Sığır Yağ Dokusundan İzole Edilen Mezenkimal Kök Hücrelerden Farklılaştırılan Nörosferlerde Sox2, ß-III Tubulin ve Nestin Ekspresyonlarının İmmunfloresan Boyama Yöntemi ile İncelenmesi

Kök hücre tedavisi, pek çok tedavisi olmayan hastalıkta olduğu gibi çoğu nörodejeneratif hastalık ve sendromda da daha iyi tedavi protokollerinin geliştirilmesi için önemli bir çalışma alanı haline gelmiştir. Kök hücrelerin klinik kullanımı pet hayvanları ve atlarda her ne kadar yaygınlaşmaya başlasa da sığırlarda kök hücre kullanımı hala oldukça sınırlıdır. Bu çalışmada sığır yağ dokusu kaynaklı mezenkimal kök hücreler izole edilmiş ve bu hücrelerden nörosfereldesi gerçekleştirilmiştir. Elde edilen nörosferlerin nöronspresifik belirteçler olan ß-III Tubulin, Nestin ve Sox2 ekspresyonları immunfloresan boyama tekniği ile değerlendirilmiştir. Çalışmadan elde edilecek sonuçlar sığır yağ dokusu kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin nörojenik potansiyelinin daha iyi anlaşılması açısından önemli olmakla birlikte bu sonuçlar sığırlarda nörojenik defektlerde kullanılabilecek potansiyel tedavi yaklaşımlarının geliştirilmesi hususunda da yol gösterici olacaktır. 

Investigation of Sox2, ß-III Tubulin and Nestin Expressions in Neuropsheres Differentiated from Bovine Adipose Derived Mesenchymal Stem Cells by Immunofluorescence Staining

Stem cell therapy can be an advantageous tool for non treatable diseases and has become a theme research for a better solution to many neurodegenerative cases. Despite of being very common in pet animals and equines in the field of veterinary medicine; stem cell based practises in bovines yet remain very limited. In the following study, Bovine adipose derived stem cells (BASCs) were isolated and differentiated into neurospheres. The potential expressions of neuron-specific markers β-III Tubulin, Nestin and Sox2 were demonstrated by immunofluorescence staining on these neurospheres. The outcomes of the study may provide a better understanding to the neurogenic potential of BASCs and can be a footstep for developing new therapeutical approaches for neurodegenerative diseases and syndroms in bovines.

___

  • Bez A, Corsini E, Curti D, Biggiogera M, Colombo A, Nicosia RF, S. F. Pagano SF, Parati EA. Neurosphere and neurosphere-forming cells: morphological and ultrastructural characterization. Brain Research. 2003: 993 (1-2):18-29.
  • Brann JH, Firestein SJ. A lifetime of neurogenesis in the olfactory system. Front Neurosci 2014; 8:182.
  • Cebo, D. Characterization Of Bovine Adipose-Derived Stem Cells. International Journal of Scientific Technology Research (IJSTR) 2017; 6 (5):16-18.
  • Chung CS, Fujita N, Kawahara N, Yui S, Nam E, Nishimura R. A comparison of neurosphere differentiation potential of canine bone marrow-derived mesenchymal stem cells and adipose-derived mesenchymal stem cells. J. Vet. Med. Sci. 2013; 75(7): 879-886
  • Chung DJ, K. Hayashi K, Toupadakis CA, Wong A, Yellowley CE. Osteogenic proliferation and differentiation of canine bone marrow and adipose tissue derived mesenchymal stromal cells and the influence of hypoxia. Research in veterinary science. 2012: 92 (1):66-75.
  • Consiglio AL, Tassan S, Corradetti B, Bizzaro D, Bignotti A, Cremonesi F. 2011. Amniotic mesenchymal-derived cells for the treatment of tendinopathy in the horse: first report. Ippologia. 2011; 22(3):13-28.
  • Corradetti B, Correani A, Romaldini A, Marini MG, Bizzaro D, Perrini C, Cremonesi F, Lange-Consiglio A. Amniotic membrane-derived mesenchymal cells and their conditioned media: potential candidates for uterine regenerative therapy in the horse. PloS one 2014: 9(10):e111324.
  • Da Silva, CG, Martins CF, Cardoso TC, Da Cunha ER, Bessler HC, Martins GHL, Pivato I, Báo SN. 2016. Production of bovine embryos and calves cloned by nuclear transfer using mesenchymal stem cells from amniotic fluid and adipose tissue. Cellular Reprogramming 2016: 18 (2):127-136.
  • Girard SD, Devéze A, Nivet E, Gepner B, Roman FS, Féron F. Isolating nasal olfactory stem cells from rodents or humans. JoVE. 2011:1 (54):e2762.
  • Hu F, Wang X, Liang G, Lv L, Zhu Y, Sun B, Xiao Z. 2013. Effects of epidermal growth factor and basic fibroblast growth factor on the proliferation and osteogenic and neural differentiation of adipose-derived stem cells. Cellular Reprogramming. 2013: 15 (3):224-232.
  • Huaman O, Bahamonde J, Cahuascanco B, Jervis M, Palomino J, Torres CG, Peralta OA. 2019. Immunomodulatory and immunogenic properties of mesenchymal stem cells derived from bovine fetal bone marrow and adipose tissue. Research in veterinary science. 2019; 124:212-222
  • Jensen JB, Parmar M. Strengths and limitations of the neurosphere culture system. Molecular neurobiology. 2006; 34 (3):153-161.
  • Lange-Consiglio A, Tassan S, Corradetti B, Meucci A, Perego R, Bizzaro D, Cremonesi F. Investigating the efficacy of amnion-derived compared with bone marrow–derived mesenchymal stromal cells in equine tendon and ligament injuries. Cytotherapy 2013; 15 (8):1011-1020.
  • Marshall GP, Reynolds BA, Laywell ED. Using the neurosphere assay to quantify neural stem cells in vivo. Current Pharmaceutical Biotechnology. 2007; 8 (3):141-145.
  • Nagase T, D. Matsumoto D, Nagase M, Yoshimura K, Shigeura T, Inoue M, Hasegawa M, Yamagishi M, Machida M. Neurospheres from human adipose tissue transplanted into cultured mouse embryos can contribute to craniofacial morphogenesis: a preliminary report. Journal of Craniofacial Surgery. 2007; 18 (1):49-53.
  • Radtke C, Schmitz B, Spies M, Kocsis J, Vogt P. Peripheral glial cell differentiation from neurospheres derived from adipose mesenchymal stem cells. Int. J. Devl Neuroscience. 2009; 27 (8):817-823.
  • Reynolds BA, Weiss S. Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian central nervous system. Science 1992; 255 (5052):1707-1710.
  • Sampaio RV, Chiaratti MR, Santos D, Bressan FF, Sangalli JR, d. Sá ALA, Silva T, Costa N, Cordeiro M, Santos S. 2015. Generation of bovine (Bos indicus) and buffalo (Bubalus bubalis) adipose tissue derived stem cells: isolation, characterization, and multipotentiality. Genet Mol Res. 2015; 14 (1):53-62.
  • Sasaki R, Aoki S, Yamato M, Uchiyama H, Wada K, Ogiuchi H, Okano T, Ando T. A protocol for immunofluorescence staining of floating neurospheres. Neuroscience letters 2010; 479 (2):126-127.
  • Theocharatos S, Wilkinson DJ, Darling S, Wilm B, Kenny SE, Edgar D. Regulation of progenitor cell proliferation and neuronal differentiation in enteric nervous system neurospheres. PloS one 2013; 8 (1):e54809.
Kocatepe Veteriner Dergisi-Cover
  • ISSN: 1308-1594
  • Yayın Aralığı: Yılda 4 Sayı
  • Başlangıç: 2008
  • Yayıncı: Afyon Kocatepe Üniversitesi
Sayıdaki Diğer Makaleler

Afyonkarahisar Damızlık Süt Sığırı İşletmelerinde Buzağı Bakımı ve Yaşama Gücünün Değerlendirilmesi

Kemal YILDIRIM, Serdar KOÇAK

Sığır Yağ Dokusundan İzole Edilen Mezenkimal Kök Hücrelerden Farklılaştırılan Nörosferlerde Sox2, ß-III Tubulin ve Nestin Ekspresyonlarının İmmunfloresan Boyama Yöntemi ile İncelenmesi

Özlem ÖZDEN AKKAYA, Tayfun DİKMEN, Shah NAWAZ

Şarole Irkı Düvelerde Tohumlama Öncesi Beslenme Performansını ve Rasyon Maliyetlerinin Belirlenmesi

Hıdır GÜMÜŞ

Günlük Yaşamda Gıda Takviyesi Olarak Kullanılan Zencefil, Zerdeçal ve Karanfilin Sitotoksik Etkilerinin Araştırılması

Özgür ALBUZ

Melaminin İnsan Kolon Adenokarsinom Hücreleri Üzerindeki Anti-Proliferatif Etkisi

Hidayet TUTUN

Afyonkarahisar'da Aile Tipi İşletmelerde California Mastitis Test ile Saptanan Subklinik Mastitis Olguları ile İlişkili Risk Faktörlerinin Belirlenmesi

Erhan ÖZENÇ

Sütçü İneklerde Beslenme Seviyesinin Belirlenmesinde, Sütte Üre Azotu (MUN) ile Bazı Parametreler Arasındaki Etkileşimin Araştırılması

Mehmet TAYTAK, İsmail BAYRAM

Subklinik Mastitisli Anadolu Mandalarında Epidermal Büyüme Faktörü Değerlerinin (EGF) Araştırılması

Hande GÜRLER, Gül Fatma YARIM, Seçkin SALAR, Arzu FINDIK, Ayris GÖKÇEOĞLU, Aytaç AKÇAY, Ayhan BAŞTAN

Farelerde NMDA Reseptör Antagonisti Mk-801 ile Böbrek ve Karaciğerde Oluşan Patolojik Değişikliklere Karşı N-Asetilsisteinin Koruyucu Etkisi

Murat Sırrı AKOSMAN, Hasan Hüseyin DEMİREL, Ruhi TÜRKMEN

Bazı Deniz Alg Türlerinin Etanol ve Metanol Ekstraktlarının Antibakteriyel Aktivitelerinin Yersinia ruckeri Üzerinde Araştırılması

Jale KORUN, Emine Şükran OKUDAN, Remziye Eda YARDIMCI, Gülşen TİMUR, Aycan ULUTAŞ, Mehmet GÖKOĞLU, Yağmur Saadet ÇELİK, Beytullah Ahmet BALCI