Valide Edilmiş HPLC Yöntemi Geliştirilmesi: Karaciğer Perfüzyon Çalışmaları İçin Numunelerden Amlodipin ve Valsartan’ın Aynı Anda Analizi

Amlodipin besilat tuzu şeklinde , yüksek tansiyonu önleyici ve anjina tedavisinde kullanılan uzun etkili bir kalsiyum kanal blokörüdür. Valsartan, anjiyotensin hormonunu bloke eden ve bu yolla kan damarlarını rahatlatan, onları genişleterek kan basıncını düşüren ve kan akışını iyileştiren bir anjiyotensin II reseptör antagonistidir. Bir anjiyotensin reseptör blokörü ve kalsiyum kanal blokörünün kombinasyonunun, yüksek tansiyon hastaları için etkili bir opsiyon sağladığı bildirilmiştir. Bu çalışmanın amacı, sözü edilen bileşiklerin aynı anda analizini gerçekleştiren bir HPLC yöntemi geliştirmektir. Çalışmalar, ters-faz HICHROM Nucleosil 100-5 C18 kolon 250 mm x 4,6 mm I.D. kullanılarak gerçekleştirilmiştir. LC sistemi, oda sıcaklığında izokratik olarak çalıştırılmış ve fosfat tamponu pH 3,6, 0,01 M : asetonitril:metanol 50:40:10 v/v karışımı, hareketli faz olarak kullanılmıştır. Hareketli faz, karıştırıldıktan sonra 0,45 μm membran filtreden süzülmüş ve 1,0 mL.min-1 akış hızında geçirilmiştir. Dedektör, 240 nm’ ye ayarlanmış ve pik alanları otomatik olarak integre edilmiştir. Bu koşullar altında amlodipin ve valsartanın her ikisi için alıkonma zamanları sırasıyla 8,23 ve 10,43 dakikadır. Yeni geliştirilen metod amlodipin ve valsartan için 0,05 – 60,00 μg.mL-1 aralığında lineer bulunmuş, LOD ve LOQ değerleri 0,02 ve 0,05 μg.mL−1 olarak hesaplanmıştır. Gün içi ve günler arası kesinlik çalışmalarının standart sapma değerleri kabul edilebilir sınırlar içerisindedir

Validated HPLC Method Development: The Simultaneous Analysis of Amlodipine and Valsartan in Samples for Liver Perfusion Studies

Amlodipine as besylate salt is a long-acting calcium channel blocker used as an anti-hypertensive and in the treatment of angina. Valsartan, an angiotensin II receptor antagonist, works by blocking angiotensin hormone thereby relaxing blood vessels, causing them to widen which lowers blood pressure and improves blood flow. It was noted that the combination of an angiotensin receptor blocker and a calcium channel blocker provides an effective option for patients with hypertension. The aim of this study was to develop an HPLC method for simultaneous determination of these compounds. The experiments were performed on a reversed-phase HICHROM Nucleosil 100-5 C18 column 250 mm x 4.6 mm I.D. . The LC system was operated isocratically at room temperature using a mobile phase consisted of phosphate buffer pH 3.6, 0.01 M : acetonitrile: methanol 50:40:10 v/v . After mixing, the mobile phase was filtered through a 0.45 μm membrane filters and run at a flow rate of 1.0 mL.min-1. The detector was set at 240 nm and peak areas were integrated automatically. Under these conditions, the retention times for amlodipine and valsartan were 8.23 and 10.43 minutes, respectively. The newly developed method was found to be linear within the range of 0.05 to 60.00 μg.mL-1, LOD and LOQ values were 0.02 and 0.05 μg.mL−1 for both amlodipine and valsartan. The standard deviation of intra- and inter-day precision studies was within the acceptable range