SIÇAN OLFAKTOR EPİTELİNDE KOLŞİSİN İNDÜKLÜ APOPİTOZİSİN P-53 İLE VE YENİLENMESİNİN PCNA İLE GÖSTERİLMESİ

Olfaktor epitelde, sıçan proteinleri için özel poliklonal antikorlar kullanılarak immünohistokimya gerçekleştirildi. Apopitozis için p-53 ve hücre proliferasyonu için PCNA (proliferating cell nuclear antigen) ile sıçan proteinleri incelendi. Ayrıca olfaktor epitel hematoksilen-eozinle boyanarak tüm yapı gözden geçirildi. Yüksek tek doz (i.p) kolşisin (6mg/kg) sıçanlara uygulandı. Uygulamadan 1 gün sonra, PCNA immün boyaması, olfaktor epitelin bazal hücrelerinde negatif bulundu oysa epiteldeki apopitotik hücreler p 53 için pozitifdi. Apopitozis immunoreaktivitesi, sitotoksik ajan kolşisin uygulandıktan sonra, en erken 1. günde görüldü. 1. ve 2.Günde, olfaktor epitelin bazı alanlarının bazal bölge hücrelerinin tümü, birkaç yuvarlak bazal hücreler ve Bowman bezlerinin kanal hücreleri hariç ölmüştü. 3.günde, hücre ölümüne cevap olarak, olfaktor epitelde proliferasyon prekürsör hücrelerde (yuvarlak bazal hücreler) ve ardından olfaktor hücrelerde rejenerasyon meydana geldi. 5-7. Günlerde, rejenerasyon doruğa ulaşmıştı, hücreler kontrolden daha fazla arttığı PCNA immün boyamasıyla belirlendi. 10-15. Günlerde, rejenerasyon meydana geldi, epitel normal görünüyordu ancak bazı bölgelerde, nadiren apopitotik hücreler gözlendi. Uygulamanın 15. gününde tam olarak rejenerasyon oluşmuştu. Bu çalışma, olfaktor epiteldeki bazal hücrelerin, epiteli yenileyebileceğini ve tam bir rejenerasyon oluşumunun zamana bağlı olacağını göstermektedir.

Anahtar Kelimeler:

Kolşisin, Olfaktor Epitel, Apopitozis, Pproliferasyon

PDF

___

1. Borisy GG, Taylor EW. 1967. The mechanism of action of colchicine. Binding of colchicine 3H to cellular protein. J Cell Biol. 34, 525-534.
2. Burd GD. 1993. Morphological study of the effects of intranasal zinc sulfate irrigation on the mause olfactory epithelium and olfactory bulb. Microsc Res Tech. 24, 195-213.
3. Caggiano M, Kauer JS, Hunter DD. 1994. Globose bazal cells are neuronal progenitors in the olfactory epithelium: a lineage analysis using a replication ancompetent retrovirus. Neuron.13, 339-352.
4. Carr V McM,Farbman AI. 1992. Ablation of the olfactory bulb up-regulates the rate of neurogenesis and induces precocious cell death in olfactory epithelium. Exp Neurol. 115: 55-59.
5. Costanzo RM.1984. Comparation of neurogenesis and cell replacement in the hamster olfactory system with and without a target (olfactory bulb). Brain Res. 307,295-301.
6. Ginn SR, Peterson GM. 1991. Colchicine induced cholinergic denervation of the hippocampus elicits sympathetic ingrowth. Brain Res. 554, 257-263.
7. Ginn SR, Peterson GM. 1992. Fate of septohippocampal neurons following intracerebroventricular injections of colchicine. Brain Res. 29, 635-642.
8. Graziadei PPC, Monti- Graziadei GA. 1979. Neurogenesis and neuron regeneration in the olfactory system of mammals. I. Morphological aspects of differantion and structural organization of the olfactory sensory neurons. J Neurocytol. 8,1-18.
9. Heale VR, Petersen K, Vanderwolf CH. 1996. Effect of colchicine-induced cell loss in the dentate gyrus and Ammon’s horn on the olfactory control of feeding in rats. Brain Res 18: 712 (2), 213-20.
10. Heale VR, Vanderwolf CH, Leung LS. 1995. The neurotoxins colchicine and kainic acid block odor-induced fast waves and olfactory-evoked potentials in the dentate gyrus of the behaving rat. Brain Res 4: 690 (2) ,157-66.
11. Huard JMT, Schwob JE. 1995. Cell cycle of globose basal cells in rat olfactory epithelium. Dev Dyn. 203, 17-26.
12. Nadi NS,Head R, Grillo M, Hempstead J, Grannot-Reisfeld N, Margolis FL. 1981. Chemical deafferantion of the olfactory bulb: plasticity of the levels of tyrosine hydroxylase, dopamine and norepinephrine. Brain Res. 213, 365-377.
13. Nakagawa-Yagi Y. 1994. Induction of apoptotic cell death in differantion neuroblastoma SH-SY5Y cells. Biochem Biophys Res Commun. 199, 807-817.
14. Schwob JE, Mieleszko Szumowski KE, Stasky AA. 1992. Olfactory sensory neurons are trophically dependent on the olfactory bulb for their prolonged survival. J Neurosci. 12, 3896- 3919.
15. Schwob JE,Youngentob SL, Mezza RC. 1995. Reconstitution of the rat olfactory epithelium after methyl bromide-induced lesion. J Comp Neurol. 359, 15-37.
16. Suzuki Y, Takeda M. 1991 (a). Basal cells in the mause olfactory epithelium after axotomy: immunohistochemical and electron microscopic studies. Cell Tissue Res. 59, 171-178.
17. Suzuki Y, Takeda M, Farbman AI. 1996. Supporting cell as phagocytes in the olfactory epithelium after bulbectomy. J Comp Neurol. 376, 509-517.
18. Suzuki Y, Takeda M, Obara N. 1998. Colchicine-induced cell death and proliferation in the olfactory epithelium and vomeronasal organ of the mouse. Anat Embryol. 198, 43-51.
19. Vaux DL, Whitney D, Weissman IL. 1996. Activation of physiological cell death mechanism by a necrosis-causing agent. Microsc Res Tech. 34, 259-266.