Güray SAYDAM, Burçin KAYMAZ TEZCANLI, VİLDAN BOZOK ÇETİNTAŞ, ASLI TETİK VARDARLI, Cumhur GÜNDÜZ

Lösemilerde t(9;22) BCR-ABL Translokasyonunun Real-Time RT-PCR ile 10 Yıllık Sonuçlarının Retrospektif Değerlendirilmesi

Amaç: Kemik iliğindeki hematopoietik hücrelerin anormal birikimiyle karakterize olan kronik myeloid lösemi (KML) için t(9;22) kromozomal translokasyonu tanısal bir belirteçtir. Philadelphia kromozomu oluşumuyla sonuçlanan translokasyon, KML olgularında gelişmekte ve hastalarının %95’inde görülmektedir ve akut lenfoblastik lösemi (ALL) ve akut myeloid lösemi (AML)’de daha kötü bir prognozun göstergesidir. Bu çalışmada, Tıbbi Biyoloji Anabilim dalında 2004-2013 yılları arasında gelen KML ön tanılı hastaların t(9;22) analizi yapılarak, sonuçlarının değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Yöntem ve gereçler: 2004-2013 yılları arasında gelen KML ön tanılı olguların, BCR-ABL füzyon gen ekspresyonun belirlenmesi, 361 çocuk ve 2433 erişkin olguda gerçekleştirilmiştir. Çocuk olgularının 125’i ve erişkin olgularının 626’sı takip hastası olup 3612 kan (%59) ve 2516 kemik iliği (%41) örneğinden total RNA veya mRNA izolasyonu gerçekleştirilmiştir. Bulgular: Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Biyoloji Anabilim dalında 2004-2013 yılları arasında 6128 t(9;22) ekspresyon analizi gerçekleştirilmiştir. Takip hastası çocuklarda (yaş ortalaması 10,43±5,07) 2 ile 26 arasında değişen 545 analiz ve erişkin takip hastalarında (yaş ortalaması 51,07±14,63) ise 2 ile 30 arasında değişen 753 analiz gerçekleştirilmiştir. Çocuk olguların 38’i ve erişkin olguların 474’ü BCR-ABL füzyon gen ekspresyonu pozitif olarak belirlenmiştir. Tartışma ve sonuç: BCR-ABL1 transkriptlerinin kan ve kemik iliğindeki kantitatif ölçümü, KML’nin ilk tanısı ve rutin tedavi sonrası t(9;22)-pozitif lösemili hücrelerin patobiyolojisini daha iyi anlamamız açısından önem taşımaktadır.

Anahtar Kelimeler:

Kronik myeloid lösemi, Philadelphia kromozom, p210, BCR/ABL

Retrospective Evaluation of 10-Year Results of T (9; 22) Bcr-Abl Translocation Via Real-Time Rt-Pcr In Leukemia

Objective: The t(9;22) chromosomal translocation is a diagnostic marker for the chronic myeloid leukemia (CML) which is characterized by abnormal accumulation of hematopoietic cells in the bone marrow. The translocation resulting in the formation of the Philadelphia chromosome; develops in KML cases and is observed in 95% of patients, it is the indicator of poorer prognosis in acute lymphoblastic leukemia (ALL) and acute myeloid leukemia (AML). In this study, the CML pre-diagnosed patients in Medical Biology Department for the 2004-2013 period are analyzed for t(9; 22) and the results are evaluated.Methods: The determination of BCR-ABL fusion gene expression for the CML pre-diagnosed patients between 2004-2013, has been conducted in 361 children and 2433 adult cases. 125 of children cases and 626 of adult cases are follow-up patients and total RNA or mRNA isolations are conducted for 3612 blood (%59) and 2516 bone marrow (%41) samples.Results: In the Medical Biology Department, 6128 t(9;22) expression analysis are conducted for the 2004-2013 period. In follow-up children cases, (average age 10.43±5.07), 545 analyses changing between 2 and 26 are conducted; in follow-up adult cases (average age 51.07±14.63), 753 analysis changing between 2 and 30 are conducted. The BCR-ABL fusion gene expression determined to be positive for 38 children cases and for 474 adult cases.Discussion and conclusion: The quantitative measurement of BCR-ABL in blood and bone marrow are important for initial diagnosis of CML and for better understanding of t(9; 22) leukemia positive cells’ pathology after routine treatment.

Keywords:

Chronic myeloid leukemia, Philadelphia chromosome, p210 BCR/ABL,

PDF

___

Referans1 Nowell P, Hungerford D. A minute chromosome in chronic granulocytic leukemia. Science 1960;132:1497.
Referans2 Rowley JD. Letter. A new consistent chromosomal abnormality in chronic myelogenous leukaemia identified by quinacrine fluorescence and Giemsa staining. Nature 1973;243(5405):290-3.
Referans3 Zheng X , Oancea C, Henschler R, Malcolm A. S. Moore, Ruthard M. Reciprocal t(9;22) ABL/BCR Fusion Proteins: Leukemogenic Potential and Effects on B Cell Commitment. PLoS One 2009;4(10):e7661.
Referans4 Klug, SW, Cummings RM. Genetik Kavramlar. Öner C. Vol. 2, Palme Yayıncılık, Ankara, 2002.
Referans5 Schulz W. Molecular Biology of Human Cancers. Springer Science and Business Media, 2005;219-226.
Referans6 Telegeev GD, Dubrovska AN, Dybkov MV, Maliuta SS. Influence of BCR/ABL fusion proteins on the course of Ph leukemias. Acta Biochim Pol 2004;51(3):845-9.
Referans7 Müller MC, Saglio G, Lin F, Pfeifer H, Press RD, Tubbs RR, Paschka P, Gottardi E, O'Brien SG, Ottmann OG, Stockinger H, Wieczorek L, Merx K, König H, Schwindel U, Hehlmann R, Hochhaus A. An international study to standardize the detection and quantitation of BCR-ABL transcripts from stabilized peripheral blood preparations by quantitative RT-PCR. Haematologica 2007;92(7):970-3.
Referans8 Mauté C, Nibourel O, Réa D, Coiteux V, Grardel N, Preudhomme C, Cayuela JM; GBMHM. Calibration of BCR-ABL1 mRNA quantification methods using genetic reference materials is a valid strategy to report results on the international scale. Clin Biochem 2014;47(13-14):1333-6.
Referans9 Moore FR, Rempfer CB, Press RD. Quantitative BCR-ABL1 RQ-PCR Fusion Transcript Monitoring in Chronic Myelogenous Leukemia. Methods Mol Biol 2013;999:1-23.
Referans10 Yaghmaie M, Ghaffari SH, Ghavamzadeh A, et al. Frequency of BCR-ABL Fusion Transcripts in Iranian Patients with Chronic Myeloid Leukemia. Arch Iranian Med 2008;11(3):247 –251.
Referans11 Hickey FB, Cotter TG. Identification of transcriptional targets associated with the expression of p210 Bcr-Abl. Eur J Haematol 2006;76:369–383.