Yersinia Pestis’ in BioMEMS Tabanlı Elektrokimyasal Cihaz ile Tespiti

Özet Yersinia pestis (Y. pestis) tarihsel süreçte yaklaşık 200 milyon insanın ölümüne neden olduğu raporlanan, veba hastalığına neden olan bakteridir. Y.pestis ayrıca kategori A biyolojik ajan olarak sınıflanmaktadır.  Hastalığın yayılımı enfekte olmuş insan ya da hayvan yoluyla olmakta, bulaşma sonrası kısa sürede ve yüksek oranda ölümle sonuçlanmaktadır. Bu nedenle müdahele süresini kısaltmak için salgının kaynağını hızlı tespit etmek çok önemlidir. Bu çalışmada, Y. pestis ‘ in hızlı tanısına yönelik biyosensör tabanlı elektrokimyasal ölçüm yöntemi geliştirilmiştir. Elektrokimyasal ölçümler TÜBİTAK BİLGEM’ de geliştirilen elektrokimyasal ölçüm cihazı ile yapılmıştır. Geliştirilen yöntemde mikro işleme teknikleri kullanılarak üretilen altın elektrotların yüzeyine HRP enzimi ile işaretlenmiş ikincil antikora bağlanan Y. pestis in varlığı ve miktarı TMB ile oluşan reaksiyon sonucunda belirlenmiştir. Biyonsensör tabanlı bu yöntem bakteriye spesifik olması, kısa sürede sonuç alınması nedeniyle gün yada saatler mertebesinde gerçekleşen konvansiyonel ölçüm yöntemlerinin yanında önem kazanmaktadır.
Anahtar Kelimeler:

Y. pestis, BioMEMS

___

  • Cao LK, Anderson GP, Ligler FS, Ezzell J. (1995). Detection of Yersinia pestis fraction 1 antigen with a fiber optic biosensor. J Clin Microbiol. Feb;33(2): 336–41.
  • Chase CJ, Ulrich MP, Wasieloski LP, Kondig JP, Garrison J, et al. (2005). Realtime PCR assays targeting a unique chromosomal sequence of Yersinia pestis. Clin Chem. 51:(22), 1778–1785.
  • Judy,(2001).J, Microelectromechanical systems (MEMS): Fabrication, design and applications, Smart Materials and Structures. 10(6):1115-1134.
  • Lorenz C, Herwegh S, Wallet F, Armand S, Guinet F, Courcol RJ. (2003). Detection of Yersinia pestis in sputum by real-time PCR. J Clin Microbiol.41(10): 4873–5. 22.
  • Matero P, Pasanen T, Laukkanen R, Tissari P, Tarkka E, et al. (2009). Real-time multiplex PCR assay for detection of Yersinia pestis and Yersinia pseudotuberculosis. APMIS . 117: 34–44. 26.
  • Amoako KK, Goji Nç, McAvin JC, McConathy MA, Rohrer AJ, Huff ,WB, Barnes WJ, et al. (2003). A real-time fluorescence polymerase chain reaction assay for the identification of Yersinia pestis using a field-deployable thermocycler. Mil Med. 168: 852–855. 21.
  • Perry, R and Fetherston, J. (1997). Yersinia pestis—Etiologic Agent of Plague, Clinical Microbiology Reviews. 10;1, 35–66.
  • Savaş S. (2018). Altın Nanopartikül İşaretli Biyosensör İle E.Coli’nin Hızlı Ve Duyarlı Tespiti. J Biotechnol and Strategic Health Res. 2(2):101-107.
  • Savas S, Ersoy A, Gulmez Y, Kilic S, Levent B, Altintas Z. (2018). Nanoparticle Enhanced Antibody and DNA Biosensors for Sensitive Detection of Salmonella. Materials, 11, 1541.
  • Simon S, Demeure C, Lamourette P, Filali S, Plaisance M, Cre´minon C, Volland H, Carniel Elisabeth, (2013). Fast and Simple Detection of Yersinia pestis Applicable to Field Investigation of Plague Foci, PLOS ONE. 8;1.
  • Splettstoesser WD, Rahalison L, Grunow R, Neubauer H, Chanteau S. (2004). Evaluation of standardized F1 capsular antigen capture ELISA test kit for the rapid diagnosis of plague. FEMS Immunol Med Microbio. l41(2):149–55. 21.Stewart A, Satterfield B, Cohen M, O’Neill K, Robison R, A. (2008). A quadruplex real-time PCR assay for the detection of Yersinia pestis and its plasmids. J Med Microbiol 57: 324–331. 24.
  • Tomaso H, Jacob D, Eickhoff M, Scholz HC, Al Dahouk S, et al. (2008). Preliminary validation of real-time PCR assays for the identification of Yersinia pestis. Clin Chem Lab Med. 46: 1239–1244. 25.
  • Tüylek, Z. (2017). Biyosensör and Nanoteknolojik Etkileşim.BEU Journal of Science.6(2): 71-80.
  • Wei H, Zhao Y, Bi Y, Liu H, Guo Z, Song Y, Zhai J, Huang H, Yang R. (2007). Direct detection of Yersinia pestis from the infected animal specimens by a fiber optic biosensor. Sensors Actuators B. 123:204–10. 23.
  • Woron AM, Nazarian EJ, Egan C, McDonough KA, Cirino NM, et al. (2006). Development and evaluation of a 4-target multiplex real-time polymerase chain reaction assay for the detection and characterization of Yersinia pestis. Diagn Microbiol Infect Dis. 56: 261–268.
  • Yang R. (2018). Plague: Recognition, Treatment, and Prevention, Journalof Clinical Microbiology. 56,1.