Tunç AKKOÇ, İsmail ÖĞÜLÜR, Ayzer TEVETOĞLU, Ayşegül İZGİ, Ö̈zden HATIRNAZ-NG, Yuk YİN-NG, Barış SAFA, Elif AYDINER-KARAKOÇ
Hiper-IgE sendromunda Th17 farklılaşması; IL-17 salınımı ve ROR?t gösterimi
Amaç: Hiper-IgE sendromu (HIES), enfeksiyona duyarlılık ve düşük sayıdaki Th17 hücreleri ile karakterize edilir. Th17 hücreleri fungal ve hücre dışı bakteriyel enfeksiyonların eliminasyonunda önemli rol oynarlar. Bu çalışmada amacımız, HIES hastaları ve sağlıklı kontroller arasında interlökin 17 (IL-17) salgılanması ve ……. (ROR?t) ekspresyonunun ölçülmesi ile Th17 hücrelerinin farklılaşmasını araştırmaktır.Yöntem: Çalışmaya 3 adet HIES tanısı almış çocuk ve 4 adet sağlıklı kontrol alındı. HIES skorları değerlendirildi ve hastaların klinik verileri hastane kayıtlarından toplandı. Th17 farklılaşması, ELİSA yöntemi ile IL-17 üretiminin ve gerçek zamanlı PZR yöntemi ile ROR-?t ekpresyonunun ölçülmesiyle değerlendirildi.Bulgular: HIES hastalarında, peripheral kan mononükleer hücreler (PKMH) ve CD45+RA naif T hücreler Th17 farklılaştırma koşullarında kültüre edildiğinde, IL-17 sitokin seviyesinde sağlıklı bireylere göre önemli derecede azalma gözlendi. Buna ek olarak, sağlıklı kontrollerin IL-17 seviyeleri forbol 12-miristat 13-asetat (FMA) ve iyonomisin uyarımlı durumda uyarımsız duruma göre daha yüksek bulundu. Ayrıca PKMH kültürlerinde IL-17 seviyesi FMA ve iyonomisin uyarımlı durumda, HIES hastaları ve sağlıklı kontroller için uyarımsız koşullarla karşılaştırıldığı zaman önemli derecede yüksek gözlendi. HIES hastasında uyarılmış PKMH’lerdeki ROR?t ekspresyon seviyesi, sağlıklı kontrolün yarı düzeyinde olarak tespit edildi.Sonuç: IL-17 salgılanması ve ROR-?t ifadesinin değerlendirilmesi mutasyon analizleri için aday olan hastaları belirlemek için yapılmalıdır. Ülkemizde bu adımların uygulanması ve bilinen mutasyonları olmayan HIES hastalarının seçimi, yeni genetik bozuklukların keşfedilmesine ve böylece yeni tedavi yaklaşımlarına olanak sağlayacaktır.
Anahtar Kelimeler:
Th17, interlökin 17 (IL-17), RAR-bağımlı orphan reseptör gama t (ROR-γt), Hiper-IgE sendromu (HIES)
Th17 Differentiation in Hyper-IgE Syndrome; IL-17 Secretion and ROR?t Expression
Objective: Hyper-IgE syndrome (HIES) is characterized by susceptibility to infection and low number of Th17 cells. Th17 is believed to be critical in the clearance of fungal and extracellular bacterial infections. Present study investigates the differentiation of Th17 cells by evaluation of interleukin 17 (IL-17) secretion and ….. (ROR?t) expression in HIES compared with healthy subjects.Method: Three children diagnosed with HIES and 4 healthy subjects were enrolled in the study. HIES scores were evaluated and clinical data of patients were collected from their hospital records. At Th17 polarizing conditions, Th17 differentiation was assessed by the secretion of IL-17 with ELISA and the expression of ROR-?t with real time PCR.Results: HIES (n=3) patients showed significantly lower levels of IL-17 secretion compared to the healthy subjects (n=4) regarding the peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and CD45+RA naive T cells cultured in Th17 differentiating conditions. In addition, phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and ionomycin stimulated IL-17 levels of healthy group were significantly higher than unstimulated conditions. Moreover, PMA and ionomycin stimulated IL-17 levels of PBMC cultures were significantly higher when compared to unstimulated conditions for both HIES patients and healthy subjects. ROR-?t expression level of stimulated PBMCs for HIES patient was detected nearly half of that of the healthy subject. Conclusion: Evaluation of IL-17 secretion and ROR-?t expression should be performed to determine the patients who are candidates for mutation analyses. Performing these steps and selection of HIES patients without known mutations in our country would provide an opportunity to discover new genetic defects and so new therapeutic approaches in HIES.
Keywords:
Th17, interleukin 17 (IL-17), RAR-related orphan receptor gamma t (ROR-γt), Hyper-IgE syndrome (HIES),
___
- Miossec P, Korn T, Kuchroo VK. Interleukin-17 and type 17 helper T cells. N Engl J Med. 2009;361:888-898.
- Kolls JK, McCray PB, Chan YR. Cytokine-mediated regulation of antimicrobial proteins. Nat Rev Immunol. 2008;8:829-835.
- Hemdan NY, Birkenmeier G, Wichmann G, Abu El-Saad AM, Krieger T, Conrad K, Sack U. Interleukin-17-producing T helper cells in autoimmunity. Autoimmun Rev. 2010;9:785-792.
- Milner JD, Brenchley JM, Laurence A, Freeman AF, Hill BJ, Elias KM, Kanno Y, Spalding C, Elloumi HZ, Paulson ML, Davis J, Hsu A, Asher AI, O’Shea J, Holland SM, Paul WE, Douek DC. Impaired T(H)17 cell differentiation in subjects with autosomal dominant hyper IgE syndrome. Nature. 2008;452:773-776.
- Lin L, Ibrahim AS, Xu X, Farber JM, Avanesian V, Baquir B, Fu Y, French SW, Edwards JE Jr, Spellberg B. Th1-Th17 cells mediate protective adaptive immunity against Staphylococcus aureus and Candida albicans infection in mice. PLoS Pathog. 2009;5:e1000703.
- Saijo S, Ikeda S, Yamabe K, Kakuta S, Ishigame H, Akitsu A, Fujikado N, Kusaka T, Kubo S, Chung SH, Komatsu R, Miura N, Adachi Y, Ohno N, Shibuya K, Yamamoto N, Kawakami K, Yamasaki S, Saito T, Akira S, Iwakura Y. Dectin-2 recognition of alpha-mannans and induction of Th17 cell differentiation is essential for host defense against Candida albicans. Immunity. 2010;32:681-691.
- Cederlund A, Olliver M, Rekha RS, Lindh M, Lindbom L, Normark S, Henriques-Normark B, Andersson J, Agerberth B, Bergman P. Impaired Release of Antimicrobial Peptides into Nasal Fluid of HyperIgE and CVID Patients. PLoS One. 2011;6(12):e29316.
- Grimbacher B, Holland SM, Gallin JI, Greenberg F, Hill SC, Malech HL, Miller JA, O’Connell AC, Puck JM. Hyper-IgE syndrome with recurrent infections-an autosomal dominant multisystem disorder. N Engl J Med. 1999;340:692-702.
- Minegishi Y. Hyper-IgE syndrome. Curr Opin Immunol. 2009;21:4874
- Holland SM, DeLeo FR, Elloumi HZ, Hsu AP, Uzel G, Brodsky N, Freeman AF, Demidowich A, Davis J, Turner ML, Anderson VL, Darnell DN, Welch PA, Kuhns DB, Frucht DM, Malech HL, Gallin JI, Kobayashi SD, Whitney AR, Voyich JM, Musser JM, Woellner C, Schäffer AA, Puck JM, Grimbacher B. STAT3 mutations in the hyper-IgE syndrome. N Engl J Med. 2007;18:1608-1619.
- Engelhardt KR, McGhee S, Winkler S, Sassi A, Woellner C, LopezHerrera G, Chen A, Kim HS, Lloret MG, Schulze I, Ehl S, Thiel J, Pfeifer D, Veelken H, Niehues T, Siepermann K, Weinspach S, Reisli I, Keles S, Genel F, Kutukculer N, Camcioğlu Y, Somer A, Karakoc-Aydiner E, Barlan I, Gennery A, Metin A, Degerliyurt A, Pietrogrande MC, Yeganeh M, Baz Z, Al-Tamemi S, Klein C, Puck JM, Holland SM, McCabe ER, Grimbacher B, Chatila TA. Large deletions and point mutations involving the dedicator of cytokinesis 8 (DOCK8) in the autosomal-recessive form of hyper-IgE syndrome. J Allergy Clin Immunol. 2009;124:1289-1302.
- Minegishi Y, Saito M, Tsuchiya S, Tsuge I, Takada H, Hara T, Kawamura N, Ariga T, Pasic S, Stojkovic O, Metin A, Karasuyama H. Dominantnegative mutations in the DNA-binding domain of STAT3 cause hyper-IgE syndrome. Nature. 2007;448:1058-1062.
- Zhang Q, Davis JC, Lamborn IT, Freeman AF, Jing H, Favreau AJ, Matthews HF, Davis J, Turner ML, Uzel G, Holland SM, Su HC. Combined immunodeficiency associated with DOCK8 mutations. N Engl J Med. 2009;361:2046-2055. 10 Warning Signs of Primary Immunodeficiency, web site: http:// www.info4pi.org/
- Akkoç T, Tevetoğlu A, Öğülür İ, İzgi A, Aydıner EK, Barış S, Bahçeciler N, Barlan I. Investigation of Th17 cell differentiation in immunodeficiencies associated with high IgE levels and/or autoimmunity. MÜSBED. 2011; 1(2):96-102.
- Vandesompele J, De Preter K, Pattyn F, Poppe B, Van Roy N, De Paepe A, Speleman F. Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multiple internal control genes. Genome Biol. 2002;3(7):RESEARCH0034.
- Livak KJ, Schmittgen TD. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method. Methods. 2001;25(4):402-408.
- Al Khatib S, Keles S, Garcia-Lloret M, Karakoc-Aydiner E, Reisli I, Artac H, Camcioglu Y, Cokugras H, Somer A, Kutukculer N, Yilmaz M, Ikinciogullari A, Yegin O,Yüksek M, Genel F, Kucukosmanoglu E, Baki A, Bahceciler NN, Rambhatla A, Nickerson DW, McGhee S, Barlan IB, Chatila T. Defects along the T(H)17 differentiation pathway underlie genetically distinct forms of the hyper IgE syndrome. J Allergy Clin Immunol. 2009;124(2):342-348.
- Yayın Aralığı: Yılda 4 Sayı
- Başlangıç: 2011
- Yayıncı: Marmara Üniversitesi
Sayıdaki Diğer Makaleler
Hiper-IgE sendromunda Th17 farklılaşması; IL-17 salınımı ve ROR?t gösterimi
Tunç AKKOÇ, İsmail ÖĞÜLÜR, Ayzer TEVETOĞLU, Ayşegül İZGİ, Ö̈zden HATIRNAZ-NG, Yuk YİN-NG, Barış SAFA, Elif AYDINER-KARAKOÇ
Yeni bir nörotransmitter/nöromodülatör olarak agmatine genel bir bakış
Salih GÜMRÜ, Ceren ŞAHİN, Feyza ARICIOĞLU
Sebzelerin besinsel fenolik ve antioksidan özelliklerinin kararlılığı pişirme yöntemine bağlıdır
İndrani KALKAN, Sevinç YÜCECAN
Fiziksel engelli çocuk ve yaşlı hastalara bakım verme yükü üzerine bir karşılaştırma çalışması