Rooting and acclimatization of in vitro micropropagated snowdrop (Galanthus ikariae Baker.) bulblets

Galanthus ikariae' nin soğan pul yapraklarından in vitro olarak elde edilen adventif soğancıkların köklendirilmesi ve dış koşullara aktarma aşaması çalışılmıştır. Köklendirme için, soğancıklar farklı konsantrasyonlarda sukroz (30, 60 g- $L^{-1}$), aktif kömür (AK) (% 0.2, 0.5 ve 1.0), naftalen asetik asit (NAA) (O, 0.01, 0.1 ve 0.5 mg- $L^{-1}$) içeren tam, 1/2, 1/4, 1/8 kuvvette hazırlanmış değiştirilmiş Murashige and Skoog (DMS) ortamlarında kültüre alınmıştır. Kültürler 23°C sıcaklık ve 16/8 saat aydınlık/karanlık fotoperypduna ayarlanmış iklim dolabında 16 hafta süreyle inkübe edilmiştir. Sonuçlar, NAA konsantrasyonun kök oluşumu için önemli faktör olduğunu göstermiştir. Diğer faktörler; Ortam kuvveti, AK ve sukroz konsantrasyonlarının köklenme üzerindeki etkileri istatistiksel olarak önemli bulunmamıştır. En yüksek köklenme oranı 0.5 mg- $L^{-1}$ NAA içeren kültür ortamlarında elde edilmiştir. Dış koşullara aktarma aşaması denemeleri için 1/8 DMS, 0.5 mg- $L^{-1}$ NAA, % 0.5 aktif kömür ye 60 g- $L^{-1}$ sukroz içeren ortam ile 1/2 DMS, 0.5 NAA, % 0.5 aktif kömür ve 30 g- $L^{-1}$ sukroz içeren ortamlarada köklendirilmiş soğancıklar ya direkt olarak veya 8 hafta 4°C' de inkübe edildikten sonra veya %2 sukroz ve gibberelik asittin (GA3) değişik dozlarını (10 ve 50 mg- $L^{-1}$) içeren DMS ortamında 4 hafta inkübe edildikten sonra toprağa aktarılmışlardır. Uygulamalardan elde edilen oranlar arasındaki farklar istatistiksel olarak önemsiz olmasına rağmen bu uygulamalar içinde en yüksek yaşama Oranı 1/2 DMS, 0.5 NAA, % 0.5 aktif kömür ve 30 g- $L^{-1}$ sukroz içeren ortamda kültüre alınarak köklendirilen ve direkt toprağa aktarılan soğancıklarda görülmüş ve % 28 olarak belirlenmiştir.

In vitro olarak mikro çoğaltımı yapılmış kardelen (Galanthus ikariae Baker.) soğancıklarının köklendirilmesi ve dış koşullarda geliştirilmesi

Rooting and acclimatization phases of Galanthus ikariae micropropagation were studied using bulblets produced in vitro from bulb-scales. For rooting, bulblets were cultured on full, 1/2, 1/4 or 1/8 strength modified Murashige and Skoog (MMS) media which contained different concentrations of sucrose (30, 60 g-$L^{-1}$), activated charcoal (AC) (0.2, 0.5 and 1.0%) and naphthalene acetic acid (NAA) (0, 0.01, 0.1 and 0.5 mg-$L^{-1}$). Cultures were incubated in a growth chamber at 23°C, 16/8 hour photoperiod for 16 week. The results indicated that NAA concentration is important factor for root formation. The effects of other factors such as medium strength, AC and sucrose concentrations on rooting were not found statistically signifficant. Compared to other dosages of NAA, the highest rate of rooting was obtained from culture media containing 0.5 mg-$L^{-1}$ NAA. For the transplantation stages of experiments, rooted bulblets in 1/8 MMS medium which contained 0.5% AC, 0.5 mg-L"1 NAA and 60 g- $L^{-1}$ sucrose concentration and 1/2 MMS medium which contained 0.5% AC, 0.5 mg- $L^{-1}$ NAA and 30 g- $L^{-1}$ sucrose concentration were transferred either directly to the sterile soil mixture or incubated for 8 weeks at 4°C or incubated for 4 weeks in MMS medium contained 2% sucrose and different concentrations of gibberellic acid (GA3) (10 or 50 mg-$L^{-1}$) and then to soil. Although the differences between the proportions obtained from treatments were statistically unsignificant, the highest rate of survival was determined as 28 % in bulblets which were rooted in 1/2 MMS medium containing 30 g- $L^{-1}$ sucrose, 0.5 % AC and 0.5 mg- $L^{-1}$ NAA and then transferred directly to the soil.

___

  • Chow, Y.N., Selby C. and Harvey, B.M.R., 1992. Stimulation by Sucrose of Narcissus Bulbil Formation in vitro. J. Hort. Sci.. 67: 289-293.
  • Ekim T., Koyuncu, M., Vural, M., Duman, H., Aytaç Z. and Adıgüzel, N., 2000. Türkiye Bitkileri Kırmızı Kitabı. (Eğrelti ve Tohumlu Bitkiler). Red Data Book of Turkish Plants (Pteridophyta and Spermatophyta).Türkiye Tabiatını Koruma Derneği, Van 100. Yıl Üniversitesi. Ankara.
  • George, E.F. and Sherington, P.R., 1984. Plant Propagation by Tissue Culture. Eastern Press, Reading, Berks. p. 679.
  • Girmen, M., 1986. Untersuchungen zur in vitro Kultur von Geophyten. Dissertation der Univ. Hannover, p.388.
  • Hosaki, T. and Asahira T., 1980. In Vitro Propagation of Narcissus. Hort. Sci. 15: 602-603.
  • Murashige, T. and Skoog, F.A., 1962. A Revised Medium for Rapid Growth and Bioassay with Tobacco Tissue Cultures. Physiol. Plant. 15: 473-479.
  • Popov, Y.G. and Cherkasov, O.A., 1984. Rapid In Vitro Propagation of Some Bulbous Species of The Family Amaryllidaceae. Sel’ Skokhozyaistvennaya Biologiya. 4: 76-79.
  • Seabrook, J.E.A., 1990. Narcissus (Daffodil). In: Handbook of Plant Cell Culture (Eds: P. V. Ammirato, D.A. Evans, W.R. Sharp and P.S. Bajaj) McCraw-Hill. New York, pp. 577-597.
  • Squires, W.M., Langton, F.A. and Fenlon, J.S., 1991. Factors Influencing The Transplantation Success of Micropropagated Narcissus bulbils. J. Hort. Sci. 66: 661-671.
  • Takayama, S. and Misawa, M., 1979. Differentiation in Lilium Bulbscales Grown In Vitro. Effect of Various Cultural Conditions. Physiol. Plant. 46: 184-190.
  • Takayama, S. and Misawa, M., 1983. The Mass Propogation of Lilium in vitro by Stimulation of Multiple Adventitious Bulb-scale Formation and by Shake Culture. Can. J. Bot. 61: 224-228.
  • Tıpırdamaz, R., Ellialtıoğlu, Ş., and Çakırlar, H., 1999. Kardelenin (Galanthus ikariae Baker.) Doku Kültürü Yoluyla Çoğaltımı: Eksplant Tipi, Ortam pH’sı ve Karbonhidrat Kaynağının Soğancık Oluşumuna Etkisi. Tr. J. Agric. Fores. 23: 823-830.
  • Sokal, R. R., and Rohlf, F. J., 1995. Biometry. The Principles and Practice of Statistics in Biological Research. Third Edition. W.H. Freeman and Co. New York, USA, 887 p.