BEKİR ÇÖL, Ebru BALCI, HATİCE GÜNEŞ, Hakan ALLI

Schizophyllum commune Fr. Türünden Misel Eldesi, Moleküler Tanımlanması ve Antitümör Etkisinin Araştırılması

Schizophyllum commune, ülkemizde sıklıkla rastlanan ve tıbbi önemi olan makrofungi türlerinden biri olup, birçok alanda; biyodegredasyon, ilaç sanayi ve gıda endüstrisinde kullanım alanına sahiptir. Çeşitli coğrafik lokasyonlardan elde edilen bu tür canlıların tanımlanması ve biyolojik etkilerinin araştırılması dünya genelinde devam etmektedir. Bu çalışmada, Muğla bölgesinden toplanan bir Schizophyllum türünün identifikasyonu, misel elde edilmesi ve antitümör aktivitelerinin ex vivo açıdan araştırılması hedeflenmiştir. Çalışmada mantar örneğinden misel üretilerek, DNA izolasyonu yapılmış ve ardından ITS gen bölgesi PCR ile çoğaltılarak saflaştırılmıştır. Mantar örneğinin ITS geninin dizi analizi sonucu, S. commune türüne %100 benzerliğe sahip olduğu gösterilmiştir. Ayrıca, mantarın kuru ve misel formlarından elde edilen etanol ekstraktları kullanılarak, PC-3 ve Hela gibi çok yaygın kanser hatlarına karşı sitotoksisitesi araştırılmıştır. Filogenetik analizi de yapılan makrofungi türünün, Beas-2B’ye oranla PC-3 ve Hela kanser hücre hatlarına karşı özellikle 0,25 mg/ml ve altındaki konsantrasyonlarda seçici öldürücü özellik gösterdiği görülmüştür.

Mycelium Growth, Molecular Identification and Investigation of Antitumor Effects Schizophyllum commune Fr.

Schizophyllum commune is one of the medicinally important macrofungi species that is widely seen in our country and has been used in various areas including biodegradation, pharmaceutical and food industries. Identification and biological effects of such species collected from various geographical locations are among the continuous efforts actively pursued worldwide. In this study, identification, mycelium growth and ex vivo antitumor activities of a Schizophyllum species collected from Mugla region is aimed. Mycelium was successfully produced from the fungus sample, DNA isolation was performed, and then the ITS gene region was amplified by PCR. As a result of ITS gene sequence analysis, the macrofungi sample was found to be 100% similar to S. commune. In addition, using the ethanol extracts obtained from both dry and mycelium forms of the specimen, cytotoxicity against common cancer lines such as PC-3 and Hela was examined. The macrofungi specimen, which is also analyzed phylogenetically, showed selective cytotoxic effects against PC-3 and Hela cancer cell lines, especially at concentrations of 0.25 mg/ml extract and below, as compared to Beas-2B.

PDF

___

Liu X., Frydenvang K., Liu H., Zhai L., Chen M., Olsen C.E., Christensen S.B. 2015. J Nat Prod., 22;78(5):1165-8.
Akanbi M.H., Post E., van Putten S.M., de Vries L., Smisterova J., Meter-Arkema A.H., Wösten H.A., Rink R. And Scholtmeijer K. 2013. The antitumor activity of hydrophobin SC3, a fungal protein, Appl Microbiol Biotechnol., 97(10):4385-92.
Nakao I., Uchino H., Orita K., Kaido I., Kimura T., Goto Y., Kondo T., Takino T., Taguchi T., Nakajima T., Fujimoto S., Miyazaki T., Miyoshi A., Yachi A., Yoshida K., Ogawa N. and Furue H. 1983. Clinical evaluation of schizophyllan (SPG) in advanced gastric cancer--a randomized comparative study by an envelope method, 10(4):1146-59.
Tabata, K., Ito, W., Kojima T., Kawabata, S. and Misaki A. 1981. Ultrasonic degradation of schizophyllan, an antitumor polysaccharide produced by Schizophyllum commune Fries, Carbohydrate research, 16;89(1): 121-35.
Komatsu N., Okubo S., Kikumoto S., Kimura K., Saito G. and Sakai S. 1969. Host-Mediated Antitümor Action of Schizophyllan, a Glucan Produced by Schizophyllum commune, Gann, 60, 137-144.
Poyraz, P., Güneş, H., Tül, B. and Sermenli B.H. 2015. Antibacterial and antitumor activity of crude extracts from various macrofungi species, Biyoloji Bilimleri Araştırma Dergisi, 8(1): 05-10.
Tamura K., Stecher G., Peterson D., Filipski A.,3 and Kumar S. 2013. MEGA6: Molecular Evolutionary Genetics Analysis Version 6.0, Oxford University, Mol. Biol. Evol. 30(12):2725–2729.
Hall T. 1997-2013. Bioedit: Biological sequence alignment editor, Ibis Biosciences, Carlsbad CA.
Balcı E. 2016. Bazı Stereum hirsutum ve Schizophyllum commune Makrofungus Türlerine ait Örneklerden Misel Üretimi ve RAPD-PCR Analizi ile Genetik Akrabalıklarının Araştırılması, Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Yüksek lisans tezi, 65s.
Rogers, R. 2011. The Fungal Pharmacy, The complete guide to medicinal mushroom& lichens to North America.
Duman R., Taner H., Doğan H.H. 2007. Bazı makrofungusların antimikrobiyal aktiviteleri, Afyon Kocatepe Üniversitesi Fen Bilimleri Dergisi, 7(1), 55-65.
Kalyoncu, F., Kalmış, E., Solak M.H. 2008. Bazı Makrofungus Türlerine Ait Misellerin Farklı Kültür Ortamlarındaki Gelişim Hızlarının Belirlenmesi, Süleyman Demirel Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Dergisi, 12-2, 109-114.i Enstitüsü, Yüksek lisans tezi, 65s.
Altınsoy B., Çelik Y. G. 2016. Fungal polisakkaritlerin bazı biyoaktivite özellikleri , Erciyes Üniversitesi Sağlık Bilimleri Dergisi, 25: 53-57.
Öztürk, A. ve Çopur, Ö.U. 2009. Mantar bileşenlerinin teröpatik etkileşimleri, Bahçe, 38(1):19-24.
Salahuddin, A.H. 2008. Biological activities of Schizophyllum commune Fr. Faculty of Science University of Malaya Kuala Lumpur, Thesis, 194s.
Kalyoncu, F., Oskay, M. ve Kalmış, E. 2010. Bazı Yabani Makrofungus Misellerinin Antimikrobiyal Aktivitelerinin Belirlenmesi, The Journal of Fungus, 1(1)1-8.