2011

Kayseri yöresinde süt sığırlarında escherıchia coli o157:h7’nin konvansiyonel ve moleküler yöntemlerle araştırılması

Bu çalış mada, Kayseri ili ve il çel eri ndeki ka mu ve özel sekt öre ait süt i şl et mel eri ndeki çeşitli yaş grupl arı ndaki sağlı klı hayvanl arı n dı şkı ve sütl eri nde E. coli O157: H7’ ni n varlı ğı nı n sapt an ması ve hayvansal ri sk f akt örl eri ni n ort aya konul ması a maçl an mı ştı r. Bu a maçl a çeşitli il çel er den toplanan 500 adet dışkı ve 500 adet süt örnekleri çalışmada materyal olarak kullanıldı. Immuno Magnetik Seperasyon ve ardından Chorom agar ve Sorbitol MacConkey (SMAC) agara ekim yapıldı. Bu besiyerlerinde üreyen şüpheli koloniler seçildi ve bunlar serolojik yönden H ve O agglütinasyon testi ile incelendi. Moleküler yönden ise şüpheli izolatlar multipleks PCR ( mPCR) ve uni pl eks PCR ( u PCR) t ekni kl eri il e i ncel endi. Bu işlemleri sonucunda 500 süt örneğinden 1 (% 2)’inde ve 500 dışkı örneğinden 6 (% 4,6)’sında O157:NM suşu tespit edilmiş olup örneklerin hiçbirinde flagella H antijenine rastlanmadı. Dışkıdan izole edilen O157:NM suşlarına yapılan mPCR’ da bir örnekte Enterohemolysine genine (Ehly A) rastlanırken, 1 örnekte yalnızca Sitotoksin 2 (stx2) geni tespit edildi. Diğer dışkı örneklerinde virülens genlerinden hiçbirisine rastlanmadı. Sütten izole edil en bi r adet O157: N M s uş unda i se vi r ül ens genlerinden hiçbirisine rastlanmadı. Sonuç olarak, Kayseri ili ve ilçelerindeki işletmelerdeki süt sığırlarının dışkısında ve sütlerinde E. coli O157 belirlenmiştir. E.coli O157:H7 tespit edilmemiştir. Belirlenen kontaminasyon oranının düşük düzeylerde olduğunu, bununla birlikte Kayseri ilinde hijyen kurallarına dikkat edilmesi gerektiği sonucuna varıldı

Investigation with conventional and molecular method of escherichia colio157:h7 in dairy cattle in Kayseri region

The objective of the present study is to investigate the animal risk factors related to the presence of E. coli 0157:H7 in feces and milk samples collected from healthy cattle at differing ages in private and governmen t dairy farms in Kayseri and its vicinity. Five hundred fecal samples and 500 raw milk samples were collected from different locations in Kayseri, processed through immune Magnetic Separation, and inoculated Chorom medium and Sorbitol MacConkey medium. Suspicious colonies were selected from this medium, and they were examined serologically with H and O agglutination test. The molecular direction suspicious isolates were examined using multiplex with PCR (mPCR) and uniplex PCR (uPCR) techniques. The examination showed that only 1 (2 %) out of500 raw milk samples and only 6 (4.6%) out of '500fecal samples contained 0157:NM strain, and none of the samples contained flagella H antigen. Through using mPCR, only one sample from 0157:NM of isolated fecal sample contained Ehly A, whereas only one sample contained stx2 genes. None of the other fecal samples contained any virulence genes. Only one raw milk sample isolated from 0157:NM strain did not have any virulence genes. In conclusion, the raw milk and fecal samples collected from dairy farms in Kayseri region and its vicinity contain E. coli 0157. Low levels of contamination rate was determined in the samples. However, it was concluded that due attention should be paid to hygien e rules in Kayseri.

PDF

___

1. Naylor SW, Gally DL, Low JC. Enterohaemorrhagic E.coli veterinary medicine. Int. J Food Microbiol 2005;295: 419-441
2.Nataro JP, Kaper JB. Diarrheagenic Escherichia coli. Clin Microbiol Rev 1998; 11: 142201.
3.Park S, Worobo R, Durst R. Escherichia coli O157:H7 As an Emerging Foodborne Pathogen: A Literature Review. Crt. Rev. Food Sci Nutrition 1999; 39(6): 481- 502.
4.Borczyk AA, Karmali MA, Lior H, et al. Bovine reservoir for verotoxin-producing Escherichia coli O 157:H7. Lancet 1. 1987; 8542:98
5.Kuhnert P, Dubosson CR, Roesch M, et al. Prevalance and risk- factor analysis of Shiga toxigenic Escherichia coli in feacal samples of organically and conventionally farmed dairy. Veterinary Microbiology 2005; 109:37-45
6.Aslantaş Ö, Erdoğan S, Cantekin Z, ve ark. Isolation and characterization of verocyto-toxin- producing Escherichia coli O157 from Turkish cattle. Int. J Food Microbiol 2006;106:338-342
7.Chapman PA, Wright DJ, Siddons CA. A comparison of immunomagnetic separation and direct culture for the isolation of verocyto-toxin-producing E.coli O157 from bovine faeces. J.Med. Microbiol 1994;40:424-427
8.Johsen G, Wasteson Y, Heir E, Gerget OI, Herikstad H. Escherichia coli O157:H7 faeces from cattle, sheep and pigs in the sout-heswest part of Norway during 1998 and 1999 . Int. J. Food Microbiol 2001; 65:193 -200
9.Halkman A. Gıda Mikrobiyolojisi Uygulamaları. 2005; 1. Baskı. Başak Matbaacılık. Ankara
10.Kobayashı H, Shımada J, Nakazawa M, et al. Prevalance Characteristics of Shiga Toxin-Producing Escherichia coli from Healthy Cattle in Japan Appl. Enviro. Microbiol 2001; .484-489
11.Chapman PA, Malo ATC, Elin M,et al. E.coli O157 in cattle and sheep at slaughter, on beef and lamb carcasses and raw beef and lamb products in South Yorkshire UK, Int .J. Food Microbiol 2001; 64: 139-150.
12.Warburton DW, Austin JW, Harrison BH, et al. Survival and Recovery E.coli O157:H7 in Inoculated Bottled Water. J.Food Protect 1998; 61(8): 948-952
13.Chapman PA, Malo ATC, Sıddons CA, et al. Use of commercial enzyme immunoassays and immunomagnetic separation systems for detecting Escherichia coli O157 in bovine fecal samples. Appl. Environ. Microbiol 1997; 63: 2549-2553.
14.Heuvelınk AE, Bleumınk B, Van Den Bıgge-laar FL, et al. Occurence and survival of ve-rocytotoxin-producing Escherichia coli O157 in raw cow's milk in Netherlands. J. Food Protect 1998; 61: 1597-1601.
15.Hancock DD, Besser TE, Rıce DH, et al. Epidemiology of Escherichia coli O157 in feedlot cattle. J Food Protect 1997; 60: 462-465.
16.Bornardi S, Maggi E, Pizzin G, et al. Feacal carriage of verocytotoxin producing E.coli O157 and carcass contamination in cattle at slaughter in Northern Italy, Int. J. Food Mic-robiol 2001; 66: 47-53.
17.Rogerie F, Marecat A, Gombade S, et al. Lan-ge M.Characterization of shiga toxin producing E.coli and E.coli O157 serotype E.coli isolated in France from healty domestic cattle. İnt. J. Food Microbiol 2001; 63: 217-223.
18.Yılmaz A, Gün H, Turan N. Manda ve Manda Karkaslarında Escherichia coli O157:H7 Varlığının araştırılması. VI. Ulusal Veteriner Mikrobiyoloji Kongresi, Fırat Üniversitesi Veteriner Fakültesi, Elazığ 2004.
19.Yılmaz A, Gun H, Yılmaz H. Frequency of Escherichia coli O157:H7 in Turkish cattle. J Food Protect 2002; 10: 1637-1640.
20.Coıa JE. Clinical, microbiological and epide-miological aspects of Escherichia coli O157 infection. FEMS Immun. Med. Microbiol 1998; 20: 1- 9.
21.Massa S, Goffredo E, Altıerı C, et al. Fate of Escherichia coli O157:H7 in unpasteurized milk stored at 8 °C. Lett. Appl. Microbiol. 1999; 28: 89-92.
22.Pıcozzı C, Foschıno R, Heuvelınk A, et al. Phenotypic and genotypic characterization of sorbitol-negative or slow-fermenting (suspected O157) Escherichia coli isolated milk samples in Lombardy region. Lett. Appl. Microbiol 2005; 40: 491-496.
23.Abdul-Raouf UM, Ammar MS, Beuchat LR. Isolation of Escherichia coli O157:H7 from some Egyptian foods. Int. J. Food Microbiol 1996; 29: 423-426.
24.Öksüz Ö, Arici M, Kurultay S, Gümüs T. Incidence of Escherichia coli O157 in raw milk and pickled cheese manifactured from raw milk in Turkey. Food Control 2004; 15: 453 -456.
25.Gönül SA, Karapınar M. Escherichia coli patojenitesi ve gıdalardaki önemi. Tr. J. Biology 1994; 18: 47- 60.