Pakistan’ın Pencap Eyaletinde Sığır ve Mandalarda Fasciolozis’in Tespitinde Copro-ELISA’nın Tanısal Etkinliği

Fasciolozis, geviş getiren hayvanlarda ve insanlarda karaciğer hasarına neden olan gıda kaynaklı zoonotik bir trematod hastalığıdır. Prepatent tanı yöntemleri ile elde edilen diagnostik bilgiler düşük hassasiyetli ve sınırlıdır. Bu çalışma, in house geliştirilen indirekt Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) kullanılarak koproantijenlerin tanısal etkinliğinin araştırılmasını amaçlamıştır. Ekskretuar sekretuar (ES) ve somatik (SA) antijenlerin ekstraksiyonu için kullanılacak erişkin helmintler bufaloların safra kanallarından toplandı. Fasciola’nın SA ve ES antijenleri ile tavşanların immunizasyonunu takiben poliklonal antikorlar üretildi. Geliştirilen ELISA testinin tanısal performansını kontrol etmek için Kappa değeri hesaplandı. Koproantijenlerin farklı konsantrasyonlardaki ortalama absorbans değerleri, kontrollerden önemli ölçüde farklı saptandı (P≤0.001). Fakat, koproantijen konsantrasyonları arasındaki fark önemli değildi. Fekal süpernatanda kullanılan antijenlerin konsantrasyonu ile absorbans değerleri arasında pozitif linear bir ilişki gözlemlendi. ES-poliklonal antikorlarla yapılan diagnostik testin duyarlılığı %100 (%95 CI: %89.42-100.00) ve özgüllüğü %76.19 (%95 CI: %52.83-91.78) saptandı. Kappa değeri, uyum gücünün neredeyse önemli derecede olduğunu ortaya koydu. SA-poliklonal antikorlarlarla yapılan diagnostik testin özgüllüğü %100 (%95 CI: %89.42-100.00) ve duyarlılığı %90.00 (%95 CU: %68.30-98.77) saptandı. Ancak, testin Kappa değeri, uyum gücünün mükemmel olduğunu ortaya koydu. Bulgular, fasciolozisin tespiti için hassas tanı yöntemlerine ek bilgi sağlayacak niteliktedir.

Diagnostic Efficacy of Copro-ELISA for Detection of Fasciolosis in Cattle and Buff aloes in Punjab Province, Pakistan

Fasciolosis is a food borne zoonotic trematode disease that causes liver damage in ruminants and humans. The information recorded on the prepatent diagnostic methods is limited with low sensitivity. The study aimed to investigate the diagnostic efficacy of coproantigens by using in house developed indirect enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Adult helminths were collected from the bile duct of buff aloes for the extraction of excretory secretory (ES) and somatic (SA) antigens. The polyclonal antibodies were produced by immunization of rabbits with SA and ES antigens of Fasciola. Kappa value of developed ELISA was calculated to check the diagnostic performance of the test. The mean absorbance values at diff erent concentrations of coproantigens were significantly diff erent (P≤0.001) from controls. However, the diff erence was not significant among the concentrations of coproantigen. A positive linear relationship was observed to the concentration of antigens used in fecal supernatant and the absorbance values. The sensitivity and specificity of diagnostic test with ES-polyclonal antibodies were 100% (95% CI: 89.42%-100.00%) and 76.19% (95% CI: 52.83.30%-91.78%), respectively. Kappa value revealed that the strength of agreement is almost substantial. The SA-polyclonal antibodies showed the specificity and sensitivity of diagnostic test were 100% (95% CI: 89.42%-100.00%) and 90.00% (95% CI: 68.30%-98.77%), respectively. However, Kappa value of the test revealed that the strength of agreement is perfect. The result provides information that will add sensitive diagnostic methods for the detection of fasciolosis.

___

  • 1. Mehmood K, Zhang H, Sabir AJ, Abbas RZ, Ijaz M, Durrani AZ, Saleem MH, Ur Rehman M, Iqbal MK, Wang Y, Ahmad HI, Abbas T, Hussain R, Ghori MT, Ali S, Khan AU, Li J: A review on epidemiology, global prevalence and economical losses of fasciolosis in ruminants. Microb Pathog, 109, 253-262, 2017. DOI: 10.1016/j.micpath.2017.06.006
  • 2. Carmona C, Tort JF: Fasciolosis in South America: Epidemiology and control challenges. J Helminthol, 91 (2): 99-109, 2017. DOI: 10.1017/ s0022149x16000560
  • 3. Barbosa R, Pinto C, Garcia P, Rodrigues A: Prevalence of fasciolosis in slaughtered dairy cattle from São Miguel Island, Azores, Portugal. Vet Parasitol Reg Stud Reports, 17:100319, 2019. DOI: 10.1016/j.vprsr. 2019.100319
  • 4. Becker AC, Kraemer A, Epe C, Strube C: Sensitivity and efficiency of selected coproscopical methods-sedimentation, combined zinc sulfate sedimentation-flotation, and McMaster method. Parasitol Res, 115 (7): 2581-2587, 2016. DOI: 10.1007/s00436-016-5003-8
  • 5. Brockwell YM, Elliott TP, Anderson GR, Stanton R, Spithill TW, Sangster NC: Confirmation of Fasciola hepatica resistant to triclabendazole in naturally infected Australian beef and dairy cattle. Int J Parasitol Drugs Drug Resist, 4 (1): 48-54, 2014. DOI: 10.1016/j.ijpddr.2013.11.005
  • 6. Spithill TW, Smooker PM, Copeman DB: Fasciola gigantica: epidemiology, control, immunology and molecular biology. In, Dalton JP (Ed): Fasciolosis. Chapter 15, 465-525, CABI Publishing, Oxon, UK, 1999.
  • 7. Sriveny D, Raina OK, Yadav SC, Chandra D, Jayraw AK, Singh M, Velusamy R, Singh BP: Cathepsin L cysteine proteinase in the diagnosis of bovine Fasciola gigantica infection. Vet Parasitol, 135 (1): 25-31, 2006. DOI: 10.1016/j.vetpar.2005.10.016
  • 8. Rojas CAA, Jex AR, Gasser RB, Scheerlinck JPY: Techniques for the diagnosis of Fasciola infections in animals: room for improvement. Adv Parasitol, 85, 65-107, 2014. DOI: 10.1016/B978-0-12-800182-0.00002-7
  • 9. Sánchez-Andrade R, Paz-Silva A, Suárez J, Panadero R, Pedreira J, Díez-Baños P, Morrondo P: Effect of fasciolicides on the antigenaemia in sheep naturally infected with Fasciola hepatica. Parasitol Res, 87 (8): 609- 614, 2001. DOI: 10.1007/s004360100425
  • 10. Mezo M, González-Warleta M, Carro C, Ubeira FM: An ultrasensitive capture ELISA for detection of Fasciola hepatica coproantigens in sheep and cattle using a new monoclonal antibody (MM3). J Parasitol, 90 (4): 845-852, 2004. DOI: 10.1645/GE-192R
  • 11. Mezo M, González-Warleta M, Ubeira FM: Optimized serodiagnosis of sheep fascioliasis by Fast-D protein liquid chromatography fractionation of Fasciola hepatica excretory–secretory antigens. J Parasitol, 89 (4): 843- 849, 2003. DOI: 10.1645/GE-74RI.1
  • 12. Bradford MM: A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem, 72, 248-254, 1976.
  • 13. Ahmad G, Nizami WA: Coproantigens: Early detection and suitability of an immunodiagnostic method for echinococcosis in dogs. Vet Parasitol, 77 (4): 237–244, 1998. DOI: 10.1016/S0304-4017(98)00124-1
  • 14. George SD, Vanhoff K, Baker K, Lake L, Rolfe PF, Seewald W, Emery DL: Application of a coproantigen ELISA as an indicator of efficacy against multiple life stages of Fasciola hepatica infections in sheep. Vet Parasitol, 246, 60-69, 2017. DOI: 10.1016/j.vetpar.2017.08.028
  • 15. Bostanci A, Oğuz B: Copro-ELISA prevalence of Fasciola hepatica in cattle in Van, Turkey. Acta Sci Vet, 45:1465, 2017. DOI: 10.22456/1679- 9216.80253
  • 16. Lagatie O, Verheyen A, Van Hoof K, Lauwers D, Odiere MR, Vlaminck J, Levecke B, Stuyver LJ: Detection of Ascaris lumbricoides infection by ABA-1 coproantigen ELISA. PLoS Negl Trop Dis, 14 (10): e0008807, 2020. DOI: 10.1371/journal.pntd.0008807
  • 17. Jara LM, Rodriguez M, Altamirano F, Herrera A, Verastegui M, Gímenez-Lirola LG, Gilman RH, Gavidia CM: Development and validation of a copro-enzyme-linked immunosorbent assay sandwich for detection of Echinococcus granulosus–soluble membrane antigens in dogs. Am J Trop Med Hyg, 100 (2): 330-335, 2019. DOI: 10.4269/ ajtmh.18-0645
  • 18. Martínez-Sernández V, Orbegozo-Medina RA, González-Warleta M, Mezo M, Ubeira FM: Rapid enhanced MM3-COPRO ELISA for detection of Fasciola coproantigens. PLoS Negl Trop Dis, 10 (7): e0004872, 2016. DOI: 10.1371/journal.pntd.0004872
  • 19. Abdel-Rahman SM, O’Reilly K, Malone JB: Evaluation of a diagnostic monoclonal antibody-based capture enzyme-linked immunosorbent assay for detection of a 26- to 28-kD Fasciola hepatica coproantigen in cattle. Am J Vet Res, 59 (5): 533-537, 1998.
  • 20. Almazán C, Avila G, Quiroz H, Ibarra F, Ochoa P: Effect of parasite burden on the detection of Fasciola hepatica antigens in sera and feces of experimentally infected sheep. Vet Parasitol, 97 (2): 101-112, 2001. DOI: 10.1016/S0304-4017(01)00376-4
  • 21. Viscidi R, Laughon BE, Hanvanich M, Bartlett JG, Yolken R: Improved enzyme immunoassays for the detection of antigens in fecal specimens. Investigation and correction of interfering factors. J Immunol Methods, 67 (1): 129–143, 1984. DOI: 10.1016/0022-1759(84)90092-9
  • 22. Espino AM, Marcet R, Finlay CM: Detection of circulating excretory– secretory antigens in human fasciolosis by sandwich enzyme-linked immunosorbent assay. J Clin Microbiol, 28 (12): 2637–2640, 1990. DOI: 10.1128/jcm.28.12.2637-2640.1990
  • 23. Deplazes P, Gottstein B, Stingelin Y, Eckert J: Detection of Taenia hydatigena coproantigens by ELISA in dogs. Vet Parasitol, 36 (1-2): 91-103, 1990. DOI: 10.1016/0304-4017(90)90097-U
  • 24. Hanna REB, Hillyer GV: Fasciola hepatica and Schistosoma mansoni: Immunofluorescent antigen localization and cross-reactivity. Exp Parasitol, 57 (1): 1-14, 1984. DOI: 10.1016/0014-4894(84)90055-9
Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi-Cover
  • ISSN: 1300-6045
  • Yayın Aralığı: Yılda 6 Sayı
  • Başlangıç: 1995
  • Yayıncı: Kafkas Üniv. Veteriner Fak.
Sayıdaki Diğer Makaleler

Clostridium perfringens’e Karşı Alum Presipite ve Yağ Adjuvanlı Multivalan Aşıların Hazırlanması ve Değerlendirilmesi

Aftab Ahmad ANJUM, Madeeha TARIQ, Ali Ahmad SHEIKH, Ali Raza AWAN, Muhammad Asad ALİ, Mian Muhammad Khubaib SATTAR, Shahid HUSSAIN, Tehreem ALI

Determinate of ECG, Oxidative Stress, and Angiogenesis in APAPInduced Toxicity in Rats

Mustafa MAKAV, Turgut DOLANBAY, HÜSEYİN FATİH GÜL, Emin KARAKURT

Madura Sığırlarında Vücut Ağırlığı Büyüme Eğrisinin Tahmini

Widya PINTAKA BAYU PUTRA, Hartati HARTATI

Travmalı Köpeklerde Travma İçin Sonografi İle Odaklı Değerlendirme Protokolü ve Hayvan Travma Triyajı Skorlama Sisteminin Karşılaştırılması

Elgin Orcum UZUNLU, Nuriza ZAMIRBEKOVA, Kurtulus PARLAK, Nuri YAVRU, Eyup Tolga AKYOL

Preparation and Evaluation of Alum Precipitate and Oil Adjuvant Multivalent Vaccines Against Clostridium perfringens

Madeeha TARIQ, Aft ab Ahmad ANJUM, Ali Ahmad SHEIKH, Ali Raza AWAN, Muhammad Asad ALİ, Mian Muhammad Khubaib SATTAR, Shahid HUSSAIN, Tehreem ALI

Sığır ve Koyunlarda Brusellozisin Tanısında Real-Time PCR’nin Analitik Yeterliliğinin Değerlendirilmesi

Doğan AKÇA, Derya KARATAŞ YEN

Eff ects of Gossypin on Fracture Healing in Experimental Femur Fractured Mouse Mechano-Bioregulatory Model

Kadri YILDIZ, Mehmet Fatih TURALIOĞLU, Veysel TAHİROĞLU, Fatih BOY, Serdar YIGIT

Evaluation of the Analytical Efficiency of Real-Time PCR in the Diagnosis of Brucellosis in Cattle and Sheep

Derya KARATAŞ YENİ, Doğan AKÇA

Kurkuminin D-17 Köpek Osteosarkom Hücre Hattı Üzerindeki Sitotoksik ve Apoptotik Etkileri

Ayşegül BİLDİK, İrem BAYAR, Gamze Sevri EKREN AŞICI, Funda KIRAL, Pınar Alkım ULUTAŞ

Düşük ve Yüksek İrtifalı Alanlarda Yetiştirilen Çubuk Başlı Kazlarda (Anser indicus) Kalp Dokusu Transkriptomlarının Karşılaştırmalı Analizi

Wen WANG, Ying Lİ, Fang WANG, Xiaolong GAO, Lilin ZHU, Kirill SHARSHOV