Hanife GENÇ, Fatih KAHRIMAN, Akın KUYULU

Domates Yaprak Güvesi Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae) 'nin Farklı Biyolojik Dönemlerinde Protein İçeriği ve Protein Fraksiyonlarındaki Değişimin İncelenmesi

Domates yaprak güvesi, Tuta absoluta (Meyrick) son yıllarda ülkemizde domatesin en önemli zararlılarından birisi haline gelmiştir. Bu araştırmada, domates yaprak güvesinin larva, pupa, ergin gibi farklı biyolojik dönemlerindeki protein içeriği ve protein fraksiyonlarındaki değişim incelenmiştir. Örnekler, Çanakkale Onsekiz Mart Üniversitesi, Ziraat Fakültesi, Böcek Moleküler Biyolojisi Laboratuvarı'nda 4 yıldır devamlı olarak yetiştirilen laboratuvar kolonisinden elde edilmiştir. Farklı biyolojik dönemlerdeki örneklerin protein içerikleri Bradford yöntemi kullanılarak tespit edilmiştir. Protein fraksiyonlarının ayrımı, %12'lik Sodyum Dodecyl Sulphate Poliakrilamid Jel (SDS-PAGE) ile gerçekleştirilmiştir. Çalışma sonucunda, domates yaprak güvesinin farklı biyolojik dönemlerindeki protein içeriğinin önemli şekilde değiştiği belirlenmiştir. En yüksek protein miktarı %9.41 ile ergin erkek bireylerde belirlenirken, en düşük protein miktarı %5.19 ile II. dönem larvalarda tespit edilmiştir. SDS-PAGE analizi sonucunda elde edilen jel görüntüsünden, boyutlara ayrılan protein fraksiyonlarının moleküler ağırlıkları yaklaşık 49 kDa ile 265 kDa arasında değiştiği saptanmıştır. Tespit edilen bantlar arasında 69 kDa moleküler ağırlığa sahip bant tüm biyolojik dönemlerde belirlenmiştir. Çalışma sonuçları doğrultusunda, domates yaprak güvesinin farklı biyolojik dönemlerinin, farklı protein içeriklerine sahip olduğu tespit edilmiştir.

Investigation of Protein Content and Protein Fractions Changes in Different Biological Stages, Tomato Leafminer Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae)

Investigation of Protein Content and Protein Fractions Changes in Different Biological Stages, Tomato Leafminer Tuta absoluta (Meyrick) (Lepidoptera: Gelechiidae) Tomato leafminer, Tuta absoluta (Meyrick) has become one of the most important pests of tomato in our county in recent years. In this study, protein contents and protein fractions changes of tomato leafminer were determined during different biological stages such as larvae, pupae and adult. The samples were obtained from laboratory colony, continuously reared for 4 years in Insect Molecular Biology Laboratory, Faculty of Agriculture, Çanakkale Onsekiz Mart University, Çanakkale Province, Turkey.Protein contents of samples in different biological stages were determined using the Bradford method. To seperate protein fractions, by 12% Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel (SDS-PAGE) analysis was performed. As a result of the study, it was determined that the content of protein in different biological stages of the tomato leafminer was significantly changed. The highest amount of protein was 9.41% in adult male individual, while the lowest amount of protein was 5.19% in II. instars. The gel image obtained from SDS-PAGE analysis, it was determined that the molecular weights of the protein fractions separated in size varied from about 49 kDa to 265 kDa.Among the bands detected, a band of 69 kDa molecular weight was determined at all biological stages. In results, it was determined that different biological stages of tomato leafminer had different protein contents.

PDF

___

Bajonero, J.G., Parra, J.R.P., 2017. Selection and suitability of an artificial diet for Tuta absoluta (Lepidoptera: Gelechiidae) based on physical and chemical characteristics. Journal of Insect Science. 17(1): 1-8.
Bradford, M.M., 1976. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical Biochemistry. 72(1-2): 248-254.
Damos, P.T., Papadopoulos, N.T., Rigas, A., Savopoulou-Soultani, M., 2011. Energetic loads and informational entropy during insect metamorphosis: Measuring structural variability and self-organization. Journal of Theoretical Biology. 286: 1-12.
Desneux, N., Luna, M.G., Guillemaud, T., Urbaneja, A. 2011. The invasive South American tomato pinworm, Tuta absoluta, continues to spread in Afro-Eurasia and beyond: the new threat to tomato world production. Journal of Pest Science. 84(4): 403-408.
Genc, H., 2016. The tomato leafminer, Tuta absoluta (Meyrick)(Lepidoptera: Gelechiidae): pupal key characters for sexing individuals. Turkish Journal of Zoology. 40(5): 801-805.
Kılıç, T., 2010. First record of Tuta absoluta in Turkey. Phytoparasitica. 38(3): 243-244.
Krechemer, F.S., Foerster, L.A., 2017. Development, Reproduction, Survival, and Demographic Patterns of Tuta absoluta (Meyrick)(Lepidoptera: Gelechiidae) on Different Commercial Tomato Cultivars. Neotropical Entomology. 1-7.
Laemmli, U.K., 1970. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 227: 680-685
Nash, W. J., Chapman, T., 2014. Effect of dietary components on larval life history characteristics in the Medfly (Ceratitis capitata: Diptera, Tephritidae). PloS One. 9(1): e86029.
Nestel, D., Nemny-Lavy, E., Chang, C.L., 2004. Lipid and protein loads in pupating larvae and emerging adults as affected by the composition of Mediterranean fruit fly (Ceratitis capitata) meridic larval diets. Archives of Insect Biochemistry and Physiology. 56(3): 97-109.
Nijhout, H.F., 2003a. The control of body size in insects. Developmental Biology. 261(1): 1-9.
Nijhout, H.F., 2003b. Development and evolution of adaptive polyphenisms. Evolution & Development. 5(1):9- 18.
Pereyra, P.C., Sánchez, N.E., 2006. Effect of two solanaceous plants on developmental and population parameters of the tomato leaf miner, Tuta absoluta (Meyrick)(Lepidoptera: Gelechiidae). Neotropical Entomology. 35(5), 671-676.
Simpson, S.J., Raubenheimer, D., 1993. A multi-level analysis of feeding behaviour: the geometry of nutritional decisions. Phil. Trans. Roy. Soc. B. 342:381-402.
Sing, K.W., Sofian-Azirun, M., Tayyab, S., 2012. Protein analysis of Chrysomya megacephala maggot meal. Animal Nutrition and Feed Technology. 12(1): 35-46.
Souza, J. C., Reis, P.R., de Padua Nacif, A., Gomes, J. M., Salgado, L.O., 1983. Controle da traça-dotomateiro. Histórico, reconhecimento, biología, prejuízos e controle. Belo Horizonte, Brazil: Empresa de Pesquisa Agropecuária de Minas Gerais, 15.
Stearns, S.C., 1992. The evolution of life histories. Oxford Univ. Press, London.
Yılmaz, Ç., Genç, H., Akı, C., 2009. Doğadan ve laboratuvardan elde edilen zeytin sineği (Bactrocera oleae) erginlerindeki toplam protein konsantrasyonların belirlenmesi. Türkiye III. Bitki Koruma Kongresi, Van 15-18 Temmuz 2009. 44p.
Yılmaz, Ç., Genç, H., 2014. Zeytin Fidan Tırtılı (Palpita unionalis Hubner) (Lepidoptera:Pyralidae) bireylerdeki toplam protein miktarının belirlenmesi. Türkiye V. Bitki Koruma Kongresi, Antalya 3-5 Şubat 2014, 136 p.