Hakan YARDIMICI, BANUR BOYNUKARA, Mehmet AKAN, K. Serdar DIKER

Van çevresindeki koyunlarda campylobacter antikorlarının ELISA ise saptanması

ÖZET Bu çalışmada, Van çevresindeki koyunlarda Campylobacter'lere karşı oluşan sınıf spesifik antikorları (IgG) belirlemek için ELISA kullanıldı. ELISA yöntemi pozitif ve negatif kontrol serumları ve peroksidaz işaretli tavşan anti-koyun IgG konjugatı kullanılarak, satranç tahtası titrasyon yöntemi ile standardize edildi. Testlerde C. fetus subsp. fetus ve C. jejuni 'den hazırlanan asit-glisin ekstrakt (AGE) antijenlerinden yararlanıldı. Van çevresindeki atık yapmış koyunlardan toplanan 210 serum Campylobacter antikorları yönünden, C. fetus subsp. fetus ve C. jejuni AGE antijeni kullanılarak ELİSA ile incelendi. Atık yapmış koyunlardan toplanan serumların % 39'u C. fetus subsp.fetus ve % 34.3'ü C. jejuni antijeni ile ELISA'da pozitif bulundu. İstatistiksel değerlendirmede iki antijene ait sonuçlar arasındaki farkın önemsiz olduğu saptandı (p>0.05). Sonuç olarak, Van çevresinde koyun campylobacteriosisinin serolojik tanısında ELISA 'mn tarama testi olarak kullanılabileceği ve testte elde edilen saha sonuçlarının infeksiyonun karakterine uygun olduğu ortaya konuldu.

Anahtar Kelimeler:

ELISA, IgG, immünoglobülinler, koyun, Campylobacter, bağışıksal tanı, bağışıklık bilimi teknikleri

Use of ELISA for detection of camylobacter antibodies in sheep in district of Van

In this study, an enzyme-linked immunosorbant assay (ELISA) was adapted to detect class specific immunoglobulin (IgG) against Campylobacter in sheep in district of Van. In checkerboard titration, acid-glycine extract (AGE) antigens of C. fetus subsp. fetus and C. jejuni were compared by using positive and negative control sera peroxidase labelled rabbit anti-sheep IgG in ELISA. The serum samples collected from 210 aborting ewes were examined for Campylobacter antibodies using AGE antigen of C. fetus subsp. fetus and C. jejuni in ELISA. It was found that there is not any significant difference (p>0.05) between ELISA results of C. fetus subsp. fetus and C. jejuni antigens, statistically. In test, 39 % and 34.3 % of aborting ewes were found to be seropositive by antigens of C. fetus subsp fetus and C. jejuni, respectively. It was concluded that ELISA can be used ( as a screening test) in the diagnosis of ovine campylobacleriosis in district of Van and, field results of ELISA show that it was convenient to character of ovine campylobacteriosis.

Keywords:

ELISA, IgG, immunoglobulins, sheep, Campylobacter, immunodiagnosis, immunological techniques,

PDF

___

1.-IIlascr M.J., Duncan D.J. (1984): Human Serum Anıibody Response to CampylOOOCltr jejııııi as Measured in an Enzyme Linkcd lmmmunowrbı:nt Assay. [nfecl. Immun .. 44: 292·8

2-8oynııkarn B .• Akgül V., Günijrk K., içf n ll .. Aksakal A., Sancak Y.C •. Gülyü7, F. (1995): Van ve yö-resinde yavru atan koyunların kan serumlarında Salmo/lella abort". 0";5 antikorlarıntn aranmast. Y. Y,o. Sa~1. BiL. Dcrg .. i: 54-57.

3-Cawthraw S .• Ayling lt., 1\"uijten I' .. Wassenaar T., NeweJl 1).G. (1994): [Süıype. Spccifıcity. and Kinetics of Systemic and Muco sal Antibodics to Caıııpylooocıu jejı",; Anıigens. lncluding Flagellin. During E~permenıal Oml [nfcctions ofChiekcn$. Avian Disea~e. 38: 341· 349.

4-Dikcr K. S. (1985): Koyun ye Sı~ırlardan Izole Edilen Canıpylobacter TOrlerinin Idcntifıkasyonu ÜL:crinde Çalışmalar, Do~a Bilim Derg. 01. 9: 232-240.

5_iker K. S., İstanbulluollu ı::. (1988): O vine Aborti· On Associatcd with Ca"'pylo/Jacıa j,jıııı;. Vet. RC(:., 118 307

6_Dikerr K. S., Sahal ~i., Aydın N. (1988): Ovinc Abor-tion Associated with CampyloOOcıueoli. Vet. Ree .• 122: 87.

7- Diker K. S. ( 1984): Çqitli Jlayvanlardan Izole Edilen Campylobacter Tıırlerinin Biyokimyasal \'0 Seroloji~ Oıelliklcri Üzerinde Çalı~malar. Doktora Tezi. Ankara..

8_Firehaınmcr LL. D .• Border M . B. (1986): Bulk Growth Proccdure and A Bunon Aggluıinaıion Tcst for Campylobacıer. Am J. Vet. Res .. 47: 1415-1418.

9-Garcia L\i . :\'1., Eaglesoıne )\-I.D .. Rigby C. ( 1983)' Campylobacıers Important in Vcterinary Medicine, Veı. Bull .. 53: 793·818.

10_Gröhn K., Gcnigrorgis C. (1985): Adaptation of ElISA for Detecüon of Campylobactcr Anıibodin and hs Applieation in Seroepidemiological Smdie~ in Shcep and Caltlc Hcrds. Acta Vet. Scand .. 26:30·48.

11. Gürtük K., lIoynukara B. Ak"akal A. ( 1996) : Im_ mutloblouing an:ılysis ofimmunglobulin G antibcdy response against cytosolublc :ınıigens of Bruceıla meIiıensis strain Rev 1 in "aturall)" infected sheep. Y.Y.Ü.Sa~1. Uil.Ocrg., 2:12-16.

12·Gürtük K .• Alan M., lIo)'nuk3ra II. Solın:ıı II. (1
13_Hedstrom O. R., Sonn R. J. , Lassen E. D., lIultgren B. D .. Crisınan R. O., Smith ll. n .. Snrder S. P. ( 1987): Pathology of Comp}"/obacıer jejıııı; Abortion in Shecp. Vet. Paıhol.. 24: 4 19-426.

14-Herbrirık Po, Munckhor Il.A.~I . Burnkeus",. M., Linderman J. Dijk W.C, (1988): Human Serum Antibody Rcsponsc in Campy/oooClrr jrjmı; Enteritis aS /l-Icasured by Enzyıne Linhd Immunosorbcm Assay. Eur. J. Clin. Mkm-bio! lofecı.Ois .. 7: 388-393.

15-Hewson P. L., Lander K.P., GiIl K.P.W. (1985): Enzyıne Linked [ınınunowıbenı Assay for Antibodies to Caıııpylobacı" fe/ıu in Bovine Vngin31 MuClIs. Res , Vet Sc;'. 38: 41-45.

16· HumS., Stephens L.R., Quinn C. ( I
17·Jones D.M .• RObim;On Il.A., Eldrigc J.(l98I ): Serologieal Studie!l in Two Outbrenks Of CaıııpJ'loooCıtr jrj,,,,; lnfection. J. Hyg .. 87: 163-170.

18·Keisler D. H •• Burke V., Copelin J .• Lause B .• Starbuck M.,Behymer D. (1989): A serologic Survey in Ewes Treaıe
19·Logan S .M., Trust T .J . (1983) : Molecular Idenıilication of Surfaı.:c Protein Anljg~ııs of CaıııpylolHıetu j~jrmi. Infect. l mmun., 42: 675·682.

20-Lowry O.H., Rosebrough NJ ., Farr A.I .. , Randall RJ.(19S1 ):Proıein Measuremenls wııh Folin Phenol Reagent. J. Biol. Dıem" 193: 265-275.

21-Mccoy E. C., Doyle D ., Burda D., Corlbei! L.B., Winter AJ. ( 1975)ı Supcrlicial Amigens of Caıııp)'lolxıcıu (Vibrio)/~tus: Ch~ıeri:tation of an Antiphagoc)'ıic Compo-nent. Infect. Immun., i i : 517-525.

22-Mysuwski M.A., S tern NJ _ (1990): Influence of Campylobacfer jl'jmıi Ceeal Colonizalion in Immunglobulin Responsc in Chickens. Avian Disease. 34: 588-594.

23-Naess V., Hofslad T. (1987): Anıigeniciıy of l ypopolysaccharides from CanıpylolxıClu jl'j"ni and Caıııpyloboeur eoli in passi\'c H:ıernaggluıin:ııion Tesıs :ınd Enıyme Unke
24·Oosterom J, Denuyl C. H., Bauffer J.R.J., Lauwers S., Huismann J., Busschbach A.E., Poelma F.G.J. ( 1985) : Evaluation of an Enzyme Unked Immunosorocm Assay (EU SA) for Deıection of eamp)'lobactu jl'jımi Amilxxlics. and Comparison with A Complemen! Finıion Tesı (CFT). Anloııie Von l..eeu"'·eııhock, 51: 321-331. 8

25-Rautelin H. (1987) : Acıd and Alcaline Campy-lob:ocıer Extracu in ıhl) n,.mn~rr:ıtion of Amilxxly Respansı: in Hyperimmıınizcd Rabbiıs. Acta " athol. Mic ro-biol. ImmunoL Seand., Seel. B. 95: 108-1 ı8.

26-Rautelin H., Kosunen T .U. ( 1987): Single and Multiple Add Exıract Anıigens in Campylob:ıcter Sı:rology. Acta Paıhol. Microbiol. ImmunoL. Sc:ınd. Sect. B, 95: 277-28ı.

27-Varga J .. Mezes B., Fodor L., Hajtos I. (1990) : Serogroups of Camp)'lolxıCll'r 11'11/1 and Comp),lobacter jl'jw'i lsolato:
28-Vo ler A., Bidwell D.E., Barlett A. ( 1979): 1lıe E.rııyme Linl::ed Immunosorbcnı Assay ( ELISA). london. Dyn:ıtech Europe Borough ..

29-Walder M., Forsgren A. (1982): Enzyme Linked Im-munosorberıı Assay (ELISA) for Anıibodies Agains t Canıp)'Iobacıer jejııııi. and lıs Clinical Applicatioıı_ Acıa Patho !' /o.l icrobio!. Immuno!.. $cand. See!. B_. 90: 423-433.

30-Watson K.C., Kerr E. J .C. (l982): Comparison of Agglulinaıion. Complemem FiJtaıion and Immunonuores-cence Tesıs in Caıııp)'lobacll'T jl'jımi Infections. J. Hyg .. 88: 165-171.

31-Yardımcı H. Diker K.S., Akan M. ( 1994): Use of EUSA ])cıeetion of Campylobacıer Anlibodies in Sheep. Tr. 1_ OfVeıennary and Animal Sci .. 18: 129-133.