Tavuk Embriyolarının Gelişim Sürecinde, IGF-I, IGF-II, bFGF, ve TGF-β2 Büyüme Faktörlerinin Expresyon Profili

Kanatl› embriyolar›ndaki çizgili kas geliflimi embriyonal myoblastlar›n aktivasyonu, ço¤almas›, farkl›laflmas›, ve füzyonuna ba¤l›d›r. IGF-I, IGF-II, TGF-β ve FGF gibi büyüme faktörleri bu proseslerle birlikte daha erken olan embriyo geliflimini düzenler. Bu büyüme faktörlerinin ayr› ayr› expresyonunu belirlemek için, ilk 6 günde (E O ile E 6 aras›) embriyonun tamam›ndan, 7. ve 8. günde (E 7 ve E 8) gö¤üs ve kar›n k›sm›ndan, 9-20. günlerde ise (E 9 ile E 20 aras›) sadece gö¤üs kaslar›ndan RNA’lar elde edildi. Daha sonra, büyüme faktörlerine ait cDNA’lar, Reverse-Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) tekni¤i kullan›larak sentez edildi. TGF-β2 haricindeki bütün büyüme faktörlerinin gen expresyonu en erken blastula aflamas›nda saptand›. IGF-I mRNA miktar› embriyonun birinci gününden itibaren azald› ve 10’uncu güne kadar düflük seviyede kald›. Di¤er taraftan, genel IGF-II mRNA miktar› embriyonun 20’nci gününe kadar iniflli ç›k›flli seyretti. fiöyleki, 16'nc› embriyonik güne kadar 1-5'nci günler aras›ndaki seviyenin yaklafl›k olarak 1/3’üne geriledi. TGF-β2 mRNA ilk olarak embriyonun 3’üncü gününde gözlendi ve miktar› küçük inifl ç›k›fllarla beraber embriyonun 18’inci gününe kadar yüksek kald›. bFGF mRNA miktar› ise 3’üncü gününde artt› ve embriyonun 13’üncü gününe kadar küçük inifl ç›k›fllarla birlikte yüksek seyretti. Bu araflt›rmada gen expresyonu ile kas geliflimini düzenleyen mekanizmalar›n zamanlamas› aras›ndaki uyuma paralel olarak, IGF-I, bFGF, TGF-β2’nin tavuklar›n embriyonik çizgili kas gelifliminde önemli bir düzenleyici olabilecegi sonucuna var›ld›.

Expression Profiles of IGF-I, IGF-II, bFGF and TGF-b2 Growth Factors during Chicken Embryonic Development

Skeletal muscle development in avian embryos depends on the activation, proliferation, differentiation, and fusion of embryonic myoblasts. These processes as well as early embryonic development are mainly regulated by major growth factors such as IGF-I, IGF-II, TGF-b and FGFs. In order to determine their differential expression, total RNA was isolated from whole embryos on each of the embryonal days (E) 0 to 6, from the thoracic/abdominal half of the embryo at E 7 and E 8, and from pectoralis muscle tissues at E 9 to E 20. Growth factor cDNAs were synthesized by reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). All growth factor messages except TGF-b2 were first detected as early as the blastula stage. IGF-I mRNA levels gradually declined on E 1 and remained lower through E 10. Levels then dramatically increased on E 11 (~ 3.5-fold) and remained high through E 13. On the other hand, overall the amount of IGF-II mRNA fluctuated from E 0 to E 20. Levels between E 0 and E 5 remained high and then declined (~ 3-fold) through E 16. TGF-b2 mRNA first appeared on E 3 and then levels remained high with slight fluctuations until E 18. bFGF mRNA levels increased (~ 2.5-fold) on E 3 and remained high with slight fluctuations until E 13. Because of the correlation of gene expression with the timing of major myogenic events, we suggest that IGF-I, bFGF and TGF-b2 are major regulators of embryonic skeletal muscle development in chickens.