Sucukta Kullanılan Farklı Hayvan Türlerine ait Etlerin PCR Tekniği ile Belirlenmesi (İngilizce)

Et ürünlerinde farklı hayvan türlerine ait etleri tespit etmek amacıyla son yıllarda PCR tekniği oldukça önem kazanmış ve mevcut yöntemlerin yerini alabilecek alternatif bir yöntem olarak öne çıkmıştır. Bu çalışmada geleneksel bir et ürünümüz olan sucukta at, eşek ve domuz türlerine ait etlerin tespitinde kullanılmak üzere spesifik bir PCR metodu geliştirilmiştir. Bu amaçla, sığır ve koyun etlerine at, eşek ve domuz etlerinden her birisi, farklı seviyelerde (%0.0, 0.1, 0.5, 1.0 ve 5.0) ilave edilerek hazırlanan ikili et karışımlarından sucuk örnekleri üretilmiştir. Mitokondrial DNA üzerinde at, eşek ve domuz türlerine spesifik (sırasıyla 153, 145 ve 227 baz çifti uzunluğunda fragment üreten) oligonükleotid primerler dizayn edilmiş ve neticede sucuk örneklerinin hepsinde; her bir tür %0.1’den %5’kadar olan tüm seviyelerde tespit edilebilmiştir. Sonuç olarak, bu çalışma kapsamında geliştirilen spesifik PCR yönteminin, et ürünlerinde bulunabilecek at, eşek ve domuz etlerinin tespitinde ülkemiz gıda kontrol laboratuarlarının ihtiyacını giderecek, rutin bir kontrol metodu olabileceği ortaya konulmuştur.

Anahtar Kelimeler:

PCR, tür tayini, sucuk, at, eşek, domuz　　　

Identification of Different Meat Species Used in Sucuk Production by PCR Assay (in English)

The PCR method has become a crucial tool for the identification of meats of different animal species in recent years and came into prominence as an alternative method that can replace the existing methods. In this study, a specific PCR method has been developed for identification of horse, donkey and porcine meats in a traditional, dry-fermented Turkish sausage, sucuk. 　For this purpose, sucuk samples were prepared from binary meat mixtures which were obtained by adding different amounts (0.0, 0.1, 0.5, 1.0 and 5.0%) of horse, donkey and porcine meats into either cattle or sheep meats. 　Oligonucleotide primers (producing fragments at a base pair (bp) length of 153, 145 and 227 respectively) that are specific to horse, donkey and porcine species were designed on the mitochondrial DNA. The results showed that each meat species could be identified at all the levels studied in the range of 0.1% to 5%, in all sucuk samples. In conclusion, it was suggested that the specific PCR method developed within the scope of this study could be used as a routine control method in food control laboratories for the identification of horse, donkey and porcine meats in the meat products.

Keywords:

PCR, meat species identification, sucuk, horse, donkey, porcine 　　,

PDF

___

1. Kang’ethe EK, Gathuma JM, Landqvist KJ. 1986. Identification of the species of origin of fresh, cooked and canned meat on meat products using antisera to thermostable muscle antigens by Ouctherlony’s double diffusion test. J Sci Food Agric, 37, 157-162.
2. Berger RG, Mageau RP, Schwap B, Johnston RW. 1988. Detection of poultry and pork in cooked and caned meat foods by enzyme linked immunosorbent assays. J Assoc Off Anal Chem Int, 71(2), 406-409.
3. Zerifi A, Labie C, Benard G. 1992. SDS-PAGE Technique fort he species identification of cooked meat. Fleishwirtschaft, 1, 54-59.
4. Amstrong SG,. Leach DN. 1992. The use of HPLC protein profiles in fish species identification. Food Chem, 44, 147-155.
5. Gallardo JM, Sotelo CG, Pineiro C, Perez-Martin RI. 1995. Use of capillary zone electrophoresis for fish species identification. Differentiation of flatfish species. J Agric Food Chem, 43, 1238-1244.
6. Hofmann K. 1987. Fundemental problems in identifying the animal species of muscle meat using electrophoretic methods. Fleischwirtshaft, 67, 820-826.
7. Jemmi T, Schlosser H. 1992. Tierartenbestimmung bei erhitztem fleisch von haus-und wildwiederkäuern mittels isoelektrische fokussierung. Fleischwirtshaft, 72, 1191-1195.
8. Koh MC, Lim CH, Chua SB, Chew ST, Phang STW. 1998. Random amplified polymorhic DNA (RAPD) fingerprints for identification of red meat animal species. Meat Sci, 48, (3/4) 275-2859. Lockley AK, Bardsley RG. 2000. DNA based methods for food authentication. Trends in Food Sci Technol, 11, 67-77.
10. Solak M, Bağcı H, Şengil AZ, Öztaş S. 2000. Moleküler Genetik ve Rekombinant DNA teknolojisi. Kocatepe Üniversitesi, Eğitim Sağlık ve Bilimsel Araştırmalar Vakfı. Yayın No:5. Afyon.
11. Rodriguez MA, García T, González I., Asensio L, Hernández P.E, Martín, R. 2004, PCR identification of beef, sheep, goat, and pork in raw and heat-treated meat mixturex. J Food Protect, 67(1),172-177.
12. Meyer R, Candrian U, Lüthy J. 1994. Detection of pork in heated meat products by Polymerase Chain Reaction (PCR). J Assoc Off Anal Chem Int, 77, 617-622.
13. Behrens M, Unthan M, Brinkmann Y, Buchholz R, Latus N. 1999. Nachweis von tierarten in erhitzten und komplexen fleischerzeugnissen durch tierart-spezifische PCR-reaktionen. Fleischwirtschaft, 79, 97-100.
14. Aslan A, İlhak İ, Çalıcıoğlu M. 2004. Isıl işlem uygulanmış sığır etlerinde polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) yöntemiyle tür tayininin saptanması. I. Ulusal Veteriner Gıda Hijyeni Kongresi. 29 Eylül-1Ekim 2004. Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dışkapı Kampusu/Ankara.
15. Aslan A, İlhak İ, Çalıcıoğlu M, Karahan M. 2004b. Identification of meats using random amplified polymorphic DNA (RAPD) technique. J Muscle Foods, 16, 37-4
16. İlhak O.İ. 2004. Polimeraz Zincir Raksiyonu (PCR) Yöntemi ile Et Türlerinin Belirlenmesi. Doktora Tezi. Fırat Üniversitesi Sağlık Bilimeri Enstitüsü Besin Hijyeni ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı. Elazığ.
17. Gökalp HY, Kaya M, Zorba Ö. 1999. Et Ürünleri İşleme Mühendisliği. Atatürk Üniversitesi Ziraat Fakültesi Ofset Tesisi. Erzurum.
18. Kesmen Z. 2005. Taze ve işlenmiş model et ürünlerinde farklı hayvan türlerine ait etlerin PCR yöntemi kullanılarak belirlenmesi. Atatürk Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Gıda Mühendisliği Anabilim Dalı Doktora Tezi, Erzurum, Türkiye, 79 s.
19. Matsunaga T, Chikuni K, Tanabe R, Muroya S, Shibata K, Yamada J, Shinmura Y. 1999. A quick and simple method for identification of meat species and meat products by PCR assay. Meat Sci, 51, 143-148.
20. Calvo JH, Zaragoza P, Osta R. 2001. Technical note: A quick and more sensitive method to identify pork in processed and unprocessed food by PCR amplification of a new specific DNA fragment. J Anim Sci, 79, 2108-2112.
21. Meyer R, Höfelein C, Lüthy J, Candrian U. 1995. Polymerase Chain Reaction- Restriction Fragment Length Polymorhyism Analysis: A simple method for species identification in food. J Assoc Off Anal Chem Int, 78 (6) 1542-1551..