Ginkgo biloba eksterinin dondurulmuş-çözülmüş sıçan kornea epitel hücrelerinin viabilitesine etkisi

Doku organizasyonundan hücre süspansiyonu haline getirilen kornea epitel hücrelerinin dondurup-saklama sonrası viabilite oranına ginkgo biloba ekstresi (EGb 761)'nin etkisinin araştırılması. Yöntem: Wistar albino tipinde 7 adet erkek sıçanın korneaları 360° limbal insizyon ile eksize edildi. Korneaların epitel tabakaları hücre süspansiyonu haline getirildi. Epitel hücreleri homojenize edilerek iki adet tüpe dağıtıldı. Tüplerden bir tanesine EGb 761 ilave edilerek hızlı bir dondurma işlemi uygulandı. Dondurma işlemi öncesi ve dondurulup saklandıktan sonra ısıtılmayı takiben Eosin-Y ile viabilite ölçümü yapıldı. Bulgular: Dondurma işlemi öncesi Eosin- Y ile yapılan viabilite ölçümlerinde kontrol grubu viabilite ortalaması % 45.5, EGb 761 grubu viabilitesi ortalaması % 37.5 bulunmuştur. Bu iki grup arasında viabilite açısından anlamlı bir fark bulunmamıştır (P= 0.061). Isıtıp çözme işlemini takiben viabilite ölçümü ortalamaları ise kontrol grubunda % 15.8, EGb 761 grubunda ise % 31.08 olarak bulunmuştur. İki grup arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark olduğu görülmüştür (P= 0.0002). Sonuç: EGb 761 ilavesi sıçan kornea epitel süspansiyonunun dondurulup-saklanmasında koruyucu bir etki göstermektedir.

The effect of Ginkgo biloba extract on the viability of freeze-thawed rat corneal epithelial celia

To dissociate rat cornea epithelium tissue to single cell suspension and to explore if adding Ginkgo Biloba extract (EGb 761) has an effect on viability after freeze-thawing procedure. Methods: Corneas of seven Wistar Albino rats were obtained by 360ş limbal incision. After dissociation was achieved the cell suspension was divided into two tubes, and to one of them EGb 761 was added. Viability was evaluated in groups before and after freeze-thaw procedure. Results: The viability of cells before freezing was 45.5% and 37.5%, respectively for control and EGb 761 treated group, there was no statistical difference (P=0.061). After thawing procedure the viability was 15.8% and 31.8% respectively which has a statistical difference (P= 0.0002). Conclusion: It can be concluded that EGb 761 has a protective effect for cryopreservation procedure for rat corneal epithelial cell suspension.

___

  • Kurt EJ. In: Human Development Anatomy. Wiley; Pennsylvania, 1988; p: 345.
  • Compton CC, Gill JM, Bradford DA, Regauer GG. Skin generated from cultured epithelial autografts on full-thickness burn wound from 6 days to 5 years after grafting. A light, electron microscopic and immunohistochemical study. Lab Invest 1989;60:600-12
  • Rheinwald JG, Gren H. Serial cultivation of strains of human epidermal keratinocytes the formation of keratinizing colonies from single cell. Cell 1975;6:331-44.
  • Lindberg K, Rheinwald JG. Three distinct keratinocyte subtypes identified in human oral epithelium by their patterns of keratin expression in culture and in xenografts. Differentation 1990;45:230-41.
  • Okka M, Aktan M. Kornea epitel hücre bankası oluşturulmasında uygulama araştırmasının ön sonuçları. T Oft Gaz 2000;30:634-38.
  • Ginkgo biloba extract (Egb 761) in perspective AIDS. Pres Ltd, Auckland 1990;1-6.
  • Lebutsson DA, Leroy Y, Rigal G. Treatment of senil macular degeneration with ginkgo biloba extract: A preliminary double-blind study versus placebo. Presse Medicale 1986;15:1556-8.
  • Szabo ME, Droy LE, Doly M, Carre C. Ischemia and reperfusion-induced histologic changes in the rat retina, demonstration of a free radical- mediated mechanism. Invest Ophthalmol Vis Sci 1991;32:1471-8.
  • Sakemi F, Nakayasu K, Okisaka S. Mitotic activity of rabbit corneal epithelium in vitro, Nippon Ganka Gakkai Zasshi 1991;95:721-7.
  • Lambiase A, Manni L, Bonini S, Rama P, Micera A, Aloe L. Nerve growth factor promotes corneal healing: Structural, biochemical, and molecular analyses of rat and human corneas, Invest Ophthalmol Vis Sci 2000;41:1063-9.
  • Jozwiak J, Skopinski P, Komar A, Wojcik A, Malejczyk J. Characterisation of epithelial cell line from rat cornea, Eye 2001;15:82-8.
  • Kenyon KR, Berman M, Rose J, Gage J. Prevention of stromal ulceration in the alkali burned rabbit cornea by flueddon contact lens evidence for the role of polymorphonuclear leukocytes in collagen degration. Invest Ophthalmol Vis Sci 1979;18:570-6.
  • Kenyon KR. Inflammatory mechanisms in corneal ulceration. Trans Am Ophthalmol Soc 1985;83:610-63.
  • Zengin N, Vural Ö, Kurt E, Gündüz K, Acaroğlu Ş, Okudan S. Tavşan kornea alkali yanık modelinde ginkgo biloba ekstresinin yara iyileşmesine etkisi. MN Oftalmoloji 1993;2:57-9.