MDAH- 2774 over kanser kök hücrelerinde kemoterapi sonrası apoptotik etkilerin incelenmesi

Amaç: Mortalitesi en yüksek jinekolojik kanser olan over kanserinin tedavisindeki asıl problem nüks ve kemoterapi direncidir. Kanser dokusunda, patogenezisden sorumlu tutulan, artmıs büyüme potansiyeline sahip, uzun ömürlü hücre popülasyonu kanser kök hücreleri (KKH) olarak adlandırılırlar. KKH’lerinin kemo-rezistans ve agresif tekrarlayan tümörlerden sorumlu olduğu düsünülmektedir. Normal kök hücreden farklılasarak kanser dokusunu olusturan bu hücreler in-vitro kosullarda Multisellüler Tümör Sferoid Model (MTS) kullanılarak izole edilmektedirler. Bu çalısmada yüksek anti-tümör aktivitesine sahip, deoksisitidin analoğu Gemcitabine (2′2′-difluorodeoxycytidine, Gemzar®)’nin KKH’leri üzerinde anti-apoptotik etkileri incelenmistir. Yöntem ve Gereç: MDAH-2774 insan over kanseri hücre hattından üç boyutlu hücre kültürü ile KKH izolasyonu yapılmıs ve sferoidler Gemcitabine ile etkilestirilmistir. 24. ve 96. saatlerde ilaçla etkilesen hücrelerdeki apoptotik değisiklikler p53, bcl-2, caspase-3 immunoreaktivitesiyle değerlendirilmistir. Bulgular: p53 immunoreaktivitesi açısından Gemcitabine uygulanan grupta 24. ve 96. saatlerde artıs görülmektedir. 24. saatlerde Gemcitabine uygulanan grupta bcl-2 immunoreaktivitesi azalmısken, 96. saatte 24. saate oranla bcl-2 belirgin artmıstır. Caspase-3 immunoreaktivitesi 24/96 saat arasında her iki grupta azalırken, 96. saatte Gemcitabine grubunda caspase-3’te azalma görülmüstür. Sonuç: p53 immunoreaktivitesinde artıs ile bcl-2’deki azalma ilaç etkinliğinin bu apoptotik yolakları kullanarak gerçeklestiğini düsündürürken, caspase-3’de beklenen artısın olmaması caspase yolağının kullanılmadığını düsündürmektedir. Bugüne kadar ilaç duyarlılık testleri ve KKH üzerine etki mekanizmaları arastırma deneyleri tek tabaka hücre kültürleri ile değerlendirilmistir. Bu arastırmaların KKH izolasyon tekniği kullanılarak değerlendirilmesi uygun olacaktır.

Apoptotic effects of chemotheraphy in the MDAH- 2774 ovarian cancer stem cell

Aim: A major problem in the treatment of ovarian cancer, which has the highest mortality rates among gyneacological malignancies, is recurrence and chemoresistance. In the cancer tissue, this population of long-lived cells with extraordinary expansion potential has been called tumor initiating cells or cancer stem cells (CSCs). It is thought that CSCs are responsible for these aggressive and recurrent tumors. These cells that differentiate from normal stem cells and form tumor tissue are isolated in-vitro via the Multicellular Tumor Spheroid Model. In this study, Gemcitabine (2′2′-difluorodeoxycytidine, Gemzar®), which is a deoxycytidine analog with excellent antitumor activity has been used for its anti-apoptotic effects.. Material and Methods: CSC isolation was been performed in-vitro three dimensional cell cultures from MDAH-2774 ovarian CSC line and acts of Gemcitabine were determined. CSCs treated at 24th and 96th hours were analyzed for apoptotic alterations with p-53, bcl-2, and caspase-3 immunoreactivity. Results: For the Gemcitabine group, p53 immunoreactivity increased at 24th and 96th hours and bcl-2 decreased at the 24th hour while an apparent increase was determined at 96th hours. Caspase-3 decreased for both groups at 24/96 hours while caspase-3 revealed decrease at 96th hours. Conclusion: Increase in p53 immunoreactivity as well as decrease in bcl-2 display that drug activity is through these pathways while caspase-3 pathway is not active. Therefore, the expected increase could not be assessed. Until now, drug sensitivity tests and effects on CSCs have been evaluated with monolayer cell culture systems. It is appropriate to evaluate these studies with CSCs isolation technique.

___

  • 1. Hu L, McArthur C, Jaffe RB. Ovarian cancer stem-like side-population cells are tumourigenic and chemoresistant. Br J Cancer. 2010 Apr 13;102(8):1276-83. Epub 2010 Mar 30.
  • 2. Güngör M, Kahraman K. Epitelyal Over Kanserinde Targeted Tedavi. Turkiye Klinikleri J Surg Med Sci 2007, 3(31):63-9.
  • 3. Shield K, Ackland ML, Ahmed N, Rice GE. Multicellular spheroids in ovarian cancer metastases: Biology and pathology. Gynecol Oncol. 2009 Apr;113(1):143-8. Epub 2009 Jan 10.
  • 4. Xenidis N, Neanidis K, Amarantidis K, Dimopoulos P, Chamalidou E, Pitsiava D, Tentes A, Chatzaki E, Karakitsos P, Kakolyris S. Biweekly vinorelbine and Gemcitabine as second-line and beyond treatment in ovarian cancer. Cancer Chemother Pharmacol. 2010 Mar 11.
  • 5. Joly F, Petit T, Pautier P, Guardiola E, Mayer F, Chevalier-Place A, Delva R, Sevin E, Henry-Amar M, Bourgeois H. Weekly combination of topotecan and Gemcitabine in early recurrent ovarian cancer patients: a French multicenter phase II study. Gynecol Oncol. 2009 Dec;115(3):382-8. Epub 2009 Sep 20.
  • 6. Lin RZ, Chang HY. Recent advances in three-dimensional multicellular spheroid culture for biomedical research. Biotechnol J. 2008 Oct;3(9-10):1172-84.
  • 7. O’Brien CA, Pollett A, Gallinger S, Dick JE. A human colon cancer cell capable of initiating tumour growth in immunodeficient mice. Nature 2007; 445:106–10.
  • 8. Neuzil J, Stantic M, Zobalova R, Chladova J, Wang X, Prochazka L, et al. Tumour-initiating cells vs cancer “stem” cells and CD133: what’s in the name? Biochem Biophys Res Commun 2007;355:855–9.
  • 9. Crino L et al (2001) Gemcitabine in advanced pancreatic cancer: a phase II trial. Am J Clin Oncol 24:296–298.
  • 10. Van Moorsel CJ et al. Gemcitabine: future prospects of single-agent and combination studies. Oncologist. 1997; 2:127–134.
  • 11. Winter RN, Kramer A, Borkowski A, Kyprianou N. Loss of Caspase-1 and Caspase-3 Protein Expression in Human Prostate Cancer. Cancer Res February 2, 2001 61; 1227.
  • 12. Elmore S. Apoptosis: a review of programmed cell death. Toxicol Pathol. 2007;35(4):495-516.
  • 13. Cory S and Adams, J. M. The Bcl-2 family: regulators of the cellular life-or-death switch. Nat Rev Cancer. 2002; 2: 647–56.
  • 14. Schuler M and Green D R. Mechanisms of p53-dependent apoptosis. Biochem Soc Trans . 2001: 29; 684–8.
  • 15. Sakahira H, Enari M, Nagata S. Cleavage of CAD inhibitor in CAD activation and DNA degradation during apoptosis.Nature. 1998 Jan 1;391(6662):96-9.
  • 16. Sartorius UA, Krammer PH. Upregulation of Bcl-2 is involved in the mediation of chemotherapy resistance in human small cell lung cancer cell lines. Int J Cancer. 2002 Feb 10;97(5):584-92.
  • 17. Zimmermann KC, Green DR. How cells die: apoptosis pathways. J Allergy Clin Immunol. 2001 Oct;108(4 Suppl):S99-103.
  • 18. Korsmeyer SJ, Shutter JR, Veis DJ, Merry DE, Oltvai ZN. Bcl-2/Bax: a rheostat that regulates an anti-oxidant pathway and cell death. Semin Cancer Biol. 1993 Dec;4(6):327-32.
  • 19. Heppner GH. Tumor heterogeneity. Cancer Res 1984; 44: 2259–2265.
  • 20. Wicha MS, Liu S, Dontu G. Cancer stem cells: an old idea—a paradigm shift. Cancer Res 2006; 66: 1883–1890.
  • 21. Hill RP. Identifying cancer stem cells in solid tumors: case not proven. Cancer Res 2006; 66: 1891–1895.
  • 22. Oktem G, Bilir A, Ayla S, Yavasoglu A, Goksel G, Saydam G, Uysal A. “Role of intercellular communications in breast cancer multicellular tumor spheroids after chemotherapy.” Oncology Res. 2007,16(5), 225-233
  • 23. Oktem G, Bilir A, Selvi N, Yurtseven ME, Vatansever S, Ates U, Uysal A, Omay SB., “Chemotherapy influences inducible nitric oxide synthase (iNOS) and endothelial nitric oxide synthase (eNOS) activity on 3D breast cancer cell line.”, Oncology Res. 2006, 16(4), 195-203.
  • 24. Murphy SK. Targeting ovarian cancer-initiating cells. Anticancer Agents Med Chem. 2010 Feb;10(2):157-63.
Ege Tıp Dergisi-Cover
  • ISSN: 1016-9113
  • Yayın Aralığı: Yılda 4 Sayı
  • Başlangıç: 1962
  • Yayıncı: Ersin HACIOĞLU
Sayıdaki Diğer Makaleler

Farklı siddetteki yürüyüs programlarının pre-menopozal kadınlarda resistin ve visfatin düzeyleri üzerine etkisi

G BÜYÜKYAZI, H ESEN, F GÖZLÜKAYA, İ ÖZCAN, H TIKIZ, C ULMAN, F TANELİ

Postmortem akciğer doku biyopsisinde vankomisine dirençli enterokok

M IŞIKGÖZ TASBAKAN, B. ARDA, F. BACAKOĞLU, H. PULLUKÇU, A TURHAN, M TOMBULOĞLU, S. ULUSOY

Es zamanlı vulva ve kolon kanseri

A ÖZSARAN, C Y SANHAL, C. ÇALIŞKAN, M C TEREK, O. ZEKİOĞLU

The effect of different intensity walking programs on resistin and visfatin levels in pre-menopausal women

G BÜYÜKYAZI, C ULMAN, F TANELİ, H ESEN, F GÖZLÜKAYA, İ ÖZCAN, H TIKIZ

Spinal tüberkülozda (Pott Hastalığı) multimodal analjezi

C. EYİGÖR, A PİRİM, E ÇAĞIRAN, M. UYAR

Hemofili A Tanılı hastada koroner arter By-pass operasyonunda aralıklı faktör VIII uygulaması ile basarılı kanama kontrolü

T YAĞDI, F SAHİN, Ç ENGİN, G SAYDAM

Mide karsinoid tümörleri

Mehmet DEMİR, R GEN, A HİLMİ

Ege Obez Hasta Okulu anket çalışması: Obezite ile obstrüktif uyku apne sendromu semptomları ve gündüz uykululuk ilişkisi

Ö K BAŞOĞLU, B S YÜREKLİ, P TAŞKIRANLAR, Ş TUNÇEL, C. YILMAZ

MDAH- 2774 over kanser kök hücrelerinde kemoterapi sonrası apoptotik etkilerin incelenmesi

S B DEMİRAY, Ş AYLA, F OLTULU, T ÇAVUŞOĞLU, Ö AKARCA, Ö Y DİLSİZ, M. ERGÜVEN, G ÖKTEM, A BİLİR

Occurence of chronic myeloid leukemia in two breast cancer survivors after 4 years

S OCAKÇI, G GÖRÜMLÜ, F SAHİN, N. ÖZSAN, O. ZEKİOĞLU, R. USLU, G SAYDAM